| NPTⅡ蛋白质在转基因水稻中的表达特征研究 |
| |
| 引用本文： | 兰金苹,武鹏程,郭美岑,史佳楠,韦汉福,荣瑞娟,郝育杰,杨烁,白影影,李莉云,吴琳,刘斯奇,尹长城,刘国振.NPTⅡ蛋白质在转基因水稻中的表达特征研究[J].生物化学与生物物理进展,2015,42(3):268-276. |
| |
| 作者姓名： | 兰金苹 武鹏程 郭美岑 史佳楠 韦汉福 荣瑞娟 郝育杰 杨烁 白影影 李莉云 吴琳 刘斯奇 尹长城 刘国振 |
| |
| 作者单位： | 河北农业大学生命科学学院，保定 071001,北京华大蛋白质研发中心有限公司，北京 101318,河北农业大学生命科学学院，保定 071001,河北农业大学生命科学学院，保定 071001,北京华大蛋白质研发中心有限公司，北京 101318,河北农业大学生命科学学院，保定 071001,北京华大蛋白质研发中心有限公司，北京 101318,河北农业大学生命科学学院，保定 071001,河北农业大学生命科学学院，保定 071001,河北农业大学生命科学学院，保定 071001,中国科学院北京基因组研究所，北京 100101,中国科学院北京基因组研究所，北京 100101,北京华大蛋白质研发中心有限公司，北京 101318,河北农业大学生命科学学院，保定 071001 |
| |
| 基金项目： | 国家科技部转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08012-006B)及北京市自然科学基金重点项目(5121001)资助 |
| |
| 摘 要： | nptⅡ编码新霉素磷酸转移酶,是转基因实验中最常用的筛选标记基因之一.本研究中,表达了重组新霉素磷酸转移酶(NPTⅡ)蛋白质,制备了单克隆抗体,建立了用免疫印迹检测转基因水稻中NPTⅡ蛋白质的方法,调查了NPTⅡ蛋白质的表达特征,包括遗传特征、表达时空特征、表达丰度和亚细胞定位等.结果表明,该方法可检测到单粒稻米的0.25%(约0.025 mg)样品中的NPTⅡ蛋白质,NPTⅡ的表达符合显性遗传规律,根据NPTⅡ的表达可对转基因T1代种子进行阴阳性及纯合株系的鉴定,对T1幼苗中NPTⅡ丰度的分析可为纯合单株的鉴定提供参考信息.定量分析表明苗期叶片中NPTⅡ蛋白质的含量约为鲜重的0.08‰.在Ca MV-35S启动子驱动下NPTⅡ蛋白质在水稻苗期、成株期的叶片和根部组织中表达量较高,而在分蘖期、孕穗期较低,NPTⅡ在不同时期的根、茎、叶、穗子、花及种子等组织中均有表达,只是在分蘖节、茎节、穗轴和花药等组织中表达量相对较低.此外,NPTⅡ蛋白质的表达主要定位在细胞质中.综上所述,本研究建立了具有应用价值的检测NPTⅡ蛋白质的免疫印记方法并系统揭示了其在水稻中的表达特征.
|
| 关 键 词： | 转基因水稻，CaMV-35S启动子，NPTⅡ蛋白质，免疫印迹技术 |
| 收稿时间： | 2014/12/8 0:00:00 |
| 修稿时间： | 1/6/2015 12:00:00 AM |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《生物化学与生物物理进展》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《生物化学与生物物理进展》下载免费的PDF全文 |
|
