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荧光偏振技术研究Bloom解旋酶催化核心与双链DNA的相互作用
引用本文:骆衡,许厚强,陈祥,刘朝乾,许庆贺,李坤.荧光偏振技术研究Bloom解旋酶催化核心与双链DNA的相互作用[J].生物化学与生物物理进展,2012,39(1).
作者姓名:骆衡  许厚强  陈祥  刘朝乾  许庆贺  李坤
基金项目:国家重点基础研究发展计划(2010CB534912),教育部博士点基金(No.200806570003),贵州省优秀人才省长资金(No.200822),贵州省国际合作项目(No.黔科合外G字[2011]7008号)资助项目,贵州大学研究生创新基金(农科2012027)
摘    要:Bloom 综合症(BLM)解旋酶是RecQ家族DNA解旋酶中的一个重要成员,参与了DNA复制、修复、转录、重组以及端粒的维持等细胞代谢过程,在维持染色体的稳定性中具有重要的作用.BLM解旋酶的突变可导致Bloom综合症,患者遗传不稳定易患多种类型癌症.本研究运用荧光偏振技术研究BLM解旋酶催化核心(BLM642-1290)与双链DNA(dsDNA)的相互作用,分析其相关特征参数,了解BLM642-1290解旋酶与dsDNA的结合和解链特性.结果表明,BLM642-1290解旋酶与dsDNA的结合和解链和dsDNA3’末端的单链DNA(ssDNA)长度有关;解旋酶优先结合于dsDNA底物的ssDNA末端,且每分子解旋酶可结合9.6 nt的ssDNA;dsDNA3’末端ssDNA的长度为9.6 nt时,解旋酶的解链效率达到最大且不再随其长度而变化.另外,BLM642-1290解旋酶也能够结合和解链钝末端dsDNA,但其结合亲和力和解链效率低于有3’末端ssDNA的dsDNA.推测BLM642-1290解旋酶在与dsDNA底物结合和解链时是单体形式,可能以尺蠖的形式解开dsDNA.这些结果可为进一步研究BLM解旋酶的功能特征提供理论基础.

关 键 词:Bloom解旋酶,DNA结合,DNA解链,荧光偏振技术
修稿时间:7/4/2012 12:00:00 AM

Study on the interactions of Bloom helicase catalytic core with double-stranded DNA by fluorescence polarization technology
LUO Heng,XU Hou-Qiang,CHEN Xiang,LIU Chao-Qian,XU Qing-He and LI Kun.Study on the interactions of Bloom helicase catalytic core with double-stranded DNA by fluorescence polarization technology[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2012,39(1).
Authors:LUO Heng  XU Hou-Qiang  CHEN Xiang  LIU Chao-Qian  XU Qing-He and LI Kun
Abstract:
Keywords:Bloom helicase  DNA binding  DNA unwinding  Fluorescence polarization technology
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