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CK8寡糖链结构及翻译水平改变与人肝癌细胞转移相关性研究
引用本文:代智,刘银坤,郭 坤,孙强玲,卢雯静,杨芃原.CK8寡糖链结构及翻译水平改变与人肝癌细胞转移相关性研究[J].生物化学与生物物理进展,2007,34(2):196-202.
作者姓名:代智  刘银坤  郭 坤  孙强玲  卢雯静  杨芃原
作者单位:1. 复旦大学附属中山医院肝癌研究所,教育部"癌变和侵袭原理"重点实验室,上海,200032
2. 复旦大学蛋白质组学研究中心,化学系,上海,200433
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划);国家高技术研究发展计划(863计划)
摘    要:糖组学方法筛查人肝癌细胞转移过程中发挥重要作用的核心岩藻糖基化蛋白质分子,解析比较筛出的差异蛋白——细胞角蛋白8(CK8)翻译及糖基化修饰改变与人肝癌细胞转移潜能的关系.应用双向电泳(2-DE)、凝集素亲和印迹、凝集素亲和沉淀联合质谱分析技术,筛查并验证与肝癌转移相关的核心岩藻糖基化蛋白;应用细胞免疫荧光和蛋白质免疫印迹检测CK8的蛋白质表达情况;应用免疫沉淀结合多种凝集素亲和印迹,推测其与肝癌转移相关的寡糖链结构改变.研究发现,3种不同转移潜能人肝癌细胞Hep3B、MHCC97-L和MHCC97-H的扁豆凝集素(LCA)亲和印迹表达谱中,分子质量55~60ku、等电点4~6区域处有核心岩藻糖基化蛋白呈差异表达,质谱鉴定为CK8.LCA亲和沉淀及蛋白质印迹进一步验证CK8异常核心岩藻糖基化与肝癌转移相关;研究发现,CK8分布于细胞浆内,在MHCC97-L和MHCC97-H细胞中蛋白质表达水平较Hep3B高,在MHCC97-H中与LCA和蓖麻凝集素(RCA-1)的亲和力较Hep3B强.以上结果提示,2-DE和凝集素印迹技术联合MALDI-TOF-MS/MS分析可用于筛查疾病过程相关的异常糖基化蛋白质分子,CK8蛋白水平、核心岩藻糖基化及β-1,4末端半乳糖基化的增加均与肝癌细胞转移潜能相关.

关 键 词:肝癌细胞  肿瘤转移  扁豆凝集素  核心岩藻糖基化
收稿时间:2006/7/16 0:00:00
修稿时间:2006-07-16

Alteration of CK8 Both in Its Expression Level and Its Glycan Parts Related to HCC Metastatic Ability
DAI Zhi,LIU Yin-Kun,GUO Kun,SUN Qiang-Ling,LU Wen-Jing and YANG Peng-Yuan.Alteration of CK8 Both in Its Expression Level and Its Glycan Parts Related to HCC Metastatic Ability[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2007,34(2):196-202.
Authors:DAI Zhi  LIU Yin-Kun  GUO Kun  SUN Qiang-Ling  LU Wen-Jing and YANG Peng-Yuan
Institution:Liver Cancer Institute, Zhongshan Hospital, Fudan University, Shanghai 200032, China;Liver Cancer Institute, Zhongshan Hospital, Fudan University, Shanghai 200032, China;Liver Cancer Institute, Zhongshan Hospital, Fudan University, Shanghai 200032, China;Liver Cancer Institute, Zhongshan Hospital, Fudan University, Shanghai 200032, China;Liver Cancer Institute, Zhongshan Hospital, Fudan University, Shanghai 200032, China;Liver Cancer Institute, Zhongshan Hospital, Fudan University, Shanghai 200032, China
Abstract:
Keywords:CK8
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