| 胶质细胞源性神经营养因子受体α1基因的克隆表达及其活性研究 |
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| 引用本文： | 王丽梅,陈哲宇,朱伟,张磬,黄爱军,路长林,何成.胶质细胞源性神经营养因子受体α1基因的克隆表达及其活性研究[J].生物化学与生物物理进展,2002,29(5):771-775. |
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| 作者姓名： | 王丽梅 陈哲宇 朱伟 张磬 黄爱军 路长林 何成 |
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| 作者单位： | 1. 第二军医大学神经生物学教研室,上海,200433
2. 中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所,上海,200031 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（30000048），上海市青年科技启明星计划（01QB14001）, 国家教育部优秀青年教师资助计划及国家重点基础研究“973”（1999054005）资助项目. |
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| 摘 要： | 为了获得重组胶质细胞源性神经营养因子受体α1（glial cell line-derived neurotrophic factor receptor alpha1, GFRα1）并研究其生物学活性，从新生4天的SD大鼠海马组织中提取总RNA，通过 RT-PCR方法，扩增出GFRα1 cDNA.将GFRα1 cDNA克隆至含T7启动子的质粒pET-28a（+）中，构建表达质粒pET-GFRα1，转化大肠杆菌BL21（DE3），获得表达菌株BLGFRα1.表达菌株经1 mmol/L IPTG诱导3～5 h后，GFRα1蛋白表达，并形成包涵体.凝胶自动扫描分析表明，GFRα1表达量占全菌总蛋白的21.5%，用Ni2+-NTA树脂纯化和复性后，纯度达90%以上，复性的重组GFRα1蛋白可显著介导GDNF促PC12细胞的存活和分化作用.
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| 关 键 词： | 胶质细胞源性神经营养因子受体α1(GFRα1)，RT-PCR，基因表达，PC12细胞 |
| 收稿时间： | 2002/3/19 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2002年3月19日 |
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