| 赭曲霉毒素 A 的高灵敏时间分辨荧光免疫分析 |
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| 引用本文： | 黄 飚,陶文沂,张莲芬,时 瑾,杨海麟,金 坚.赭曲霉毒素 A 的高灵敏时间分辨荧光免疫分析[J].生物化学与生物物理进展,2005,32(7):662-666. |
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| 作者姓名： | 黄 飚 陶文沂 张莲芬 时 瑾 杨海麟 金 坚 |
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| 作者单位： | 1. 江南大学生物工程学院生物制药系,工业生物技术教育部重点实验室,无锡,214036;江苏省原子医学研究所,无锡,214063
2. 江南大学生物工程学院生物制药系,工业生物技术教育部重点实验室,无锡,214036 |
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| 基金项目： | 国家"十五"科技公关项目(2004BA501A16)和江苏省无锡市社会发展项目(SC030006). |
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| 摘 要： | 采用时间分辨荧光免疫分析 (TRFIA) 技术建立快速的高灵敏度的赭曲霉毒素 A (OTA) 全自动检测方法 . 将 OTA-BSA 作为免疫分子免疫 Balb/c 小鼠， OTA-KLH 为筛选用抗原包被板，用间接酶联免疫分析 (ELISA) 法筛选出专一针对 OTA 的高效价的阳性克隆 3G9 ，用杂交瘤细胞制备抗 OTA 单克隆抗体 . 用 OTA-BSA 包被 96 孔板为固相抗原，与游离 OTA 共同竞争有限的抗 OTA 单克隆抗体，以稀土离子 Eu3+ 标记的羊抗鼠抗体进行示踪，采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析体系中建立 OTA-TRFIA. 该方法的灵敏度为 0.03 μg /L ，测量范围为 0.03 ~1 000 μg /L ，批内和批间变异分别为 3.7% 和 5.3% ，平均回收率为 94.2% ，与赭曲霉毒素 B 的平均交叉反应为 3.7% ，与黄曲霉毒素 B1 、 牛血清白蛋白和苯基丙氨酸无交叉反应，说明抗体的特异性很好 . 8 条不同时间进行的间接竞争 OTA-TRFIA 的效应点均值 ED80 、 ED50 、 ED20 分别为 (0.33±0.02) μg /L、 (1.44 ±0.08) μg /L 和 (5.22 ± 0.12) μg /L ，说明方法的稳定性好，样品经 TRFIA 和 ELISA 试剂盒同时检测 OTA ，两者的相关系数为 0.925 ，结果相符 . 研究表明， OTA-TRFIA 是目前报道的 OTA 检测中最灵敏的方法，该分析方法稳定性好，可测范围宽，具有很好的应用前景 .
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| 关 键 词： | 赭曲霉毒素 A (OTA) ，时间分辨荧光免疫分析 (TRFIA) ，真菌毒素，单克隆抗体 |
Ultrasensitive Time-resolved Fluoroimmunoassay of Ochratoxin A |
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| HUANG Biao,TAO Wen-Yi,ZHANG Lian-Fen,SHI Jin,YANG Hai-Lin and JIN Jian.Ultrasensitive Time-resolved Fluoroimmunoassay of Ochratoxin A[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2005,32(7):662-666. |
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| Authors: | HUANG Biao TAO Wen-Yi ZHANG Lian-Fen SHI Jin YANG Hai-Lin and JIN Jian |
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| Institution: | 1)The Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Southern Yangtze University, Wuxi 214036, China; 2) Jiangsu Institute of Nuclear Medicine, Wuxi 214063, China;The Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Southern Yangtze University, Wuxi 214036, China;The Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Southern Yangtze University, Wuxi 214036, China;The Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Southern Yangtze University, Wuxi 214036, China;The Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Southern Yangtze University, Wuxi 214036, China;The Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Southern Yangtze University, Wuxi 214036, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ochratoxin A time-resolved fluoroimmunoassay(TRFIA) mycotoxin monoclonal antibody |
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