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食管癌细胞NGAL基因-152~-60区段存在TPA反应元件
引用本文:许丽艳,李恩民,牛永东,蔡唯佳,袁华敏,常静霞,沈忠英,曾毅.食管癌细胞NGAL基因-152~-60区段存在TPA反应元件[J].生物化学与生物物理进展,2006,33(2).
作者姓名:许丽艳  李恩民  牛永东  蔡唯佳  袁华敏  常静霞  沈忠英  曾毅
作者单位:1. 北京工业大学生命科学与生物工程学院病毒与药理研究室,北京,100022;汕头大学医学院肿瘤病理研究室,汕头,515041
2. 汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室,汕头,515041
3. 汕头大学医学院肿瘤病理研究室,汕头,515041
4. 北京工业大学生命科学与生物工程学院病毒与药理研究室,北京,100022
基金项目:国家自然科学基金;广东省博士启动基金;广东省博士启动基金
摘    要:以往研究发现,在TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophilgelatinase-associatedlipocalin,NGAL)基因过表达,但过表达机制不明.最近研究提示,食管癌细胞NGAL启动子及其邻近区域可能存在着TPA反应元件.为了对NGAL的这一TPA反应元件进行更准确定位,采用PCR法结合嵌套缺失实验从食管癌细胞中克隆了NGAL5′侧翼区-152~ 84、-140~ 84、-78~ 84、-59~ 84、-50~ 84、-41~ 84、-37~ 84、-29~ 84和-10~ 84等片段,并定向插入pGLB、pGLP或pGLE等萤火虫荧光素酶报告基因表达载体中,构建了pGLB-152、pGLP-152、pGLE-152、pGLB-140、pGLB-78、pGLB-59、pGLB-50、pGLB-41、pGLB-37、pGLB-29和pGLB-10等系列报告基因表达载体.将上述报告基因表达载体分别同pRL-TK共转染食管癌细胞EC109,并用TPA刺激,检测TPA刺激转染EC109的相对荧光素酶活力,综合判定NGAL-152~ 84区不同长度片段的TPA反应性,对NGAL启动子区的TPA反应元件给予进一步分段定位.结果表明,NGAL启动子区的TPA反应元件位于-152~-60区段,而且应答TPA刺激的反应能力很强.生物信息学分析结果显示,NGAL启动子区所存在的TPA反应元件很可能是一种新结构类型.研究说明,NGAL在DNA序列上有应答TPA刺激的结构基础,将有助于深入到分子水平揭示TPA诱导永生化食管上皮细胞癌变中NGAL过表达机制,也有助于进一步认识TPA信号细胞内传递途径网络在肿瘤发生发展中的作用.

关 键 词:中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白基因  食管癌细胞  基因表达调控  TPA反应元件

There are TPA Response Elements in -152 ~ -60 Position of NGAL Gene 5' Flanking Region in The Esophageal Cancer Cells EC109
XU Li-Yan,LI En-Min,NIU Yong-Dong,CAI Wei-Jia,YUAN Hua-Min,CHANG Jing-Xia,SHEN Zhong-Ying,ZENG Yi.There are TPA Response Elements in -152 ~ -60 Position of NGAL Gene 5'' Flanking Region in The Esophageal Cancer Cells EC109[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2006,33(2).
Authors:XU Li-Yan  LI En-Min  NIU Yong-Dong  CAI Wei-Jia  YUAN Hua-Min  CHANG Jing-Xia  SHEN Zhong-Ying  ZENG Yi
Abstract:
Keywords:neutrophil gelatinase-associated lipocalin gene  esophageal cancer cells  gene expression regulation  TPA response element
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