蛋白激酶Cα对人正常肝和肝癌细胞中Ha-ras基因表达的影响 |
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引用本文: | 冯怡,柳惠图,高萍.蛋白激酶Cα对人正常肝和肝癌细胞中Ha-ras基因表达的影响[J].生物化学与生物物理进展,2002,29(5):781-785. |
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作者姓名: | 冯怡 柳惠图 高萍 |
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作者单位: | 北京师范大学生命科学学院,细胞增殖及调控生物学教育部重点实验室,北京,100875 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(39870366). |
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摘 要: | 运用基因转染技术,将蛋白激酶C(PKCα)cDNA正向插入的真核表达重组质粒pXJ41-PKCα,导入人正常肝细胞(L-02),经蛋白质免疫印迹等检验,表明成功构建了稳定过表达PKCα的人正常肝细胞模型(LT3),用LT3和表达反义PKCα的人肝癌细胞HT6为细胞模型,通过RT-PCR,蛋白质印迹(Western blot)等分析和进一步运用自行构建的真核表达质粒prasGL3,进行荧光素酶活性检测表明:过表达PKCα可以促进L-02细胞的增殖速率,并引起Ha-ras基因转录水平上升和Ha-ras启动子活性升高;反之,表达反义PKCα的BEL-7402细胞增殖被抑制,Ha-ras基因转录水平下降,Ha-ras启动子活性降低.通过实验我们首次观察到,PKCα亚类对Ha-ras癌基因表达的影响与其对Ha-ras启动子活性的作用有关,PKCα可能参与了对Ha-ras基因表达的调控.
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关 键 词: | 蛋白激酶Cα,人正常肝细胞L-02,人肝癌细胞BEL-7402,Ha-ras基因启动子 |
收稿时间: | 2002/3/26 0:00:00 |
修稿时间: | 2002年3月26日 |
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