转录因子E2F1抑制CREG表达调控体外培养的人血管平滑肌细胞分化 |
| |
引用本文: | 韩雅玲,赵昕,闫承慧,康 建,张效林,邓 捷,徐红梅,刘海伟.转录因子E2F1抑制CREG表达调控体外培养的人血管平滑肌细胞分化[J].生物化学与生物物理进展,2007,34(5):490-496. |
| |
作者姓名: | 韩雅玲 赵昕 闫承慧 康 建 张效林 邓 捷 徐红梅 刘海伟 |
| |
作者单位: | 沈阳军区总医院全军心血管病研究所心内科,沈阳,110016 |
| |
基金项目: | 国家自然科学基金;辽宁省自然科学基金 |
| |
摘 要: | 为探讨转录因子E2F1在血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)表型转化中的作用及其对E1A激活基因阻遏子(cellular repressor of E1A-stimulated genes,CREG)表达调控的分子机制,应用生物信息学方法,定位人CREG(hCREG)基因启动子并确定转录因子E2F1在hCREG启动子区的结合位点,PCR方法克隆并构建hCREG基因启动子绿色荧光报告基因载体,以hCREG启动子区E2F1结合位点为模板,化学合成E2F1寡聚脱氧核苷酸(ODN)和错配E2F1ODN,利用转录因子"诱骗(Decoy)"策略,用E2F1ODN转染体外培养的VSMCs以阻断E2F1与hCREG基因启动子区的结合,蛋白质印迹(Western blot)分析检测阻断前后细胞内hCREG蛋白、报告基因绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)和平滑肌细胞分化标志蛋白SMα-actin表达变化.结果显示:分化表型HITASY细胞中E2F1表达下调伴出核转位,而增殖表型的HITASY细胞中E2F1蛋白表达明显增加且定位于核内.进一步应用FuGene6瞬时转染E2F1ODN和错配E2F1ODN于体外培养HITASY细胞中,蛋白质印迹分析发现,转染E2F1ODN后,HITASY细胞中hCREG、SMα-actin和GFP表达均较未阻断组及错配组细胞明显增加.上述研究结果证实,E2F1是hCREG基因转录的重要调控因子,能够直接结合于hCREG启动子区阻遏hCREG表达,参与hCREG蛋白对VSMCs表型转化的调控作用.
|
关 键 词: | 转录因子 阻遏蛋白 表型 血管平滑肌细胞 |
收稿时间: | 2006/11/2 0:00:00 |
修稿时间: | 2/8/2007 12:00:00 AM |
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录! |
| 点击此处可从《生物化学与生物物理进展》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《生物化学与生物物理进展》下载免费的PDF全文 |
|