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H7N2禽流感病毒HA的分离纯化及其糖链谱研究
引用本文:李学甜,孙宇,杜亚蓉,王喜龙,张沛欣,钟耀刚,马恬然,王秀荣,李铮.H7N2禽流感病毒HA的分离纯化及其糖链谱研究[J].生物化学与生物物理进展,2015,42(6):551-562.
作者姓名:李学甜  孙宇  杜亚蓉  王喜龙  张沛欣  钟耀刚  马恬然  王秀荣  李铮
作者单位:西北大学生命科学学院功能糖组学实验室,西安 710069,西北大学生命科学学院功能糖组学实验室,西安 710069,西北大学生命科学学院功能糖组学实验室,西安 710069,西北大学生命科学学院功能糖组学实验室,西安 710069,西北大学生命科学学院功能糖组学实验室,西安 710069,西北大学生命科学学院功能糖组学实验室,西安 710069,西北大学生命科学学院功能糖组学实验室,西安 710069,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,国家禽流感研究参考实验室, 哈尔滨 150001,西北大学生命科学学院功能糖组学实验室,西安 710069
基金项目:科技部国际科技合作计划(2009DFA32730)资助项目
摘    要:血凝素(HA)是位于流感病毒囊膜表面的一种Ⅰ型跨膜糖蛋白,是流感病毒结合宿主细胞表面受体,介导病毒入胞的关键分子,也是中和抗体以及疫苗研制的重要靶标.HA表面糖基化与病毒毒力、感染宿主范围等密切相关,且其表面糖链变化会影响其结构与功能.然而目前关于流感病毒HA糖基化的研究主要集中在其糖基化位点上,而对于HA上详细的糖链结构知之甚少.本文应用禽流感病毒特异识别的唾液酸糖链(SAα2-3Gal)受体,制备特异的糖链磁性微粒复合物,进而从H7N2禽流感病毒中分离纯化HA,并采用SDS-PAGE及质谱技术进行鉴定.确定提取物系HA后,进一步利用凝集素芯片联合质谱技术研究禽流感病毒H7N2的HA表面糖型,结果显示H7N2禽流感病毒HA表面主要含有岩藻糖、半乳糖、N-乙酰半乳糖胺、甘露糖、N-乙酰葡糖胺等糖链结构,共获得16个糖链结构较为准确的寡糖,这些糖链可能与HA生物学功能相关.本研究有助于揭示禽流感病毒感染宿主的糖链作用机制,有助于设计制备针对HA相关的糖链疫苗.

关 键 词:禽流感病毒,血凝素,糖链谱,凝集素芯片,质谱
收稿时间:2015/1/23 0:00:00
修稿时间:2015/4/20 0:00:00

Purification and Glycan Profile of Hemagglutinin From Avian Influenza A (H7N2) Virus
LI Xue-Tian,SUN Yu,DU Ya-Rong,WANG Xi-Long,ZHANG Pei-Xin,ZHONG Yao-Gang,MA Tian-Ran,WANG Xiu-Rong and LI Zheng.Purification and Glycan Profile of Hemagglutinin From Avian Influenza A (H7N2) Virus[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2015,42(6):551-562.
Authors:LI Xue-Tian  SUN Yu  DU Ya-Rong  WANG Xi-Long  ZHANG Pei-Xin  ZHONG Yao-Gang  MA Tian-Ran  WANG Xiu-Rong and LI Zheng
Abstract:
Keywords:avian influenza virus  hemagglutinin  glycan profile  lectin microarrays  mass spectrometry
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