用噬菌体展示筛选Gal-α-1,3-Gal的模拟肽 |
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引用本文: | 张晖,詹金彪,许林海,严志焜,王克夷.用噬菌体展示筛选Gal-α-1,3-Gal的模拟肽[J].生物化学与生物物理进展,2003,30(3):461-465. |
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作者姓名: | 张晖 詹金彪 许林海 严志焜 王克夷 |
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作者单位: | 1. 浙江大学医学院生物化学教研室,杭州,310006 2. 浙江省人民医院,杭州,310014 3. 中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所,上海,200031 |
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基金项目: | 浙江省人民医院“抗移植排斥新药”课题资助. |
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摘 要: | 猪心移植是解决心脏移植供体少的有效方法.由于猪心血管内皮细胞表面抗原半乳糖-α-1,3-半乳糖(Gal-α-1,3-Gal),能与人体内预存的天然抗体结合产生超急性排斥反应(HAR),而无法应用于临床.为了解决这一难题, 应用噬菌体展示技术,筛选出一个能与抗B型血单克隆抗体(mAB anti-B) 特异性结合的阳性噬菌体克隆,应用酶联免疫吸附测定(ELISA)和竞争性ELISA结果表明,所获得的阳性噬菌体克隆能特异性地与mAB anti-B结合,并且这种结合可被蜜二糖(具有Gal-α-1,6-Glc的结构)所竞争抑制.由此推测,筛选到的噬菌体阳性克隆很可能就结合在蜜二糖与mAB anti-B结合的位点.同时,进行了阳性噬菌体克隆的抑制猪红细胞凝集活性试验,试验结果表明,此阳性克隆不仅可抑制Gal-α-1,3-Gal与抗体的结合, 也可抑制Gal-α-1,3-Gal与西非单叶豆凝集素(GS-I-B4)的结合.此噬菌体阳性克隆测序后,得小肽序列为CCWLLRQPVRFVRSIRS.鉴于以上的结果,认为此小肽可以作为Gal-α-1,3-Gal的模拟肽,同时有望开发成抗猪器官异种移植超急性排斥反应的新药.
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关 键 词: | 噬菌体展示,超急性排斥反应,猪红细胞凝集试验,西非单叶豆凝集素(GS-I-B4) |
收稿时间: | 2002/12/11 0:00:00 |
修稿时间: | 2002年12月11 |
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