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一氧化氮诱导食管癌细胞线粒体DNA编码基因过表达
引用本文:李恩民,许丽艳,杨帆,袁兰,陈跃.一氧化氮诱导食管癌细胞线粒体DNA编码基因过表达[J].生物化学与生物物理进展,2002,29(3):378-384.
作者姓名:李恩民  许丽艳  杨帆  袁兰  陈跃
作者单位:1. 汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室,汕头,515031
2. 汕头大学医学院肿瘤病理研究室,汕头,515031
3. 北京大学医药卫生分析中心,北京,100083
基金项目:广东省自然科学基金资助项目(990799, 984068)和广东省医学科学技术研究基金资助项目(B1999105).
摘    要:以人食管癌细胞系EC109作为驱赶方(driver),以被一氧化氮(nitric oxid,NO)诱导的EC109作为实验方(tester),应用抑制消减杂交(suppression subtractive hybridization, SSH)、反向mRNA斑点印迹和RNA印迹等技术手段研究了NO诱导的食管癌细胞中基因的过表达情况.然后对过表达基因的表达序列标签(expressed sequence tag,EST)实施序列测定,并与GenBank进行BLAST同源性比较和序列突变分析.结果先后两次从69个SSH阳性克隆中共鉴定出6个线粒体DNA(mitochondrial DNA, mtDNA)编码的基因,即ND-4L、ND-4、COX-2、Lys-tRNA、ATP-8和ATP-6.表明NO可以诱导食管癌细胞mtDNA编码的基因过表达.另外,在ND-4L/ND-4基因的片段(10 736~11 449)上发现了三处同型单核苷酸置换(10 872 T→C, 11 001 A→G, 11 346 A→G),在COX-2/Lys-tRNA/ATP-8/ATP-6基因片段(8 011~8 589)上发现了一处单核苷酸缺失(8 380 A).氨基酸序列分析表明,在NO诱导的EC109中可能存在着一种结构异常的ATP-8肽链(一条在N端被截短的只有11个氨基酸残基的肽链,而正常的ATP-8肽链为68个氨基酸残基).这些研究结果为深入揭示NO对肿瘤细胞的作用机制提供了新的重要线索.

关 键 词:食管癌,一氧化氮,线粒体DNA编码基因,基因过表达,抑制消减杂交
收稿时间:2001/12/14 0:00:00
修稿时间:2001年12月14

Overexpression of Mitochondria DNA Encoded Genes in Human Esophageal Carcinoma Cell Line Induced by Nitric Oxide
LI En-Min,XU Li-Yan,Yang-Fan,YUAN Lan and CHEN Yue.Overexpression of Mitochondria DNA Encoded Genes in Human Esophageal Carcinoma Cell Line Induced by Nitric Oxide[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2002,29(3):378-384.
Authors:LI En-Min  XU Li-Yan  Yang-Fan  YUAN Lan and CHEN Yue
Abstract:
Keywords:esophageal carcinoma  mitochondrial DNA coding genes  overexpression  nitric oxide  suppression subtractive hybridization
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