| 丙型肝炎病毒 NS3 螺旋酶寡核苷酸 适配子的筛选与鉴定 |
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| 引用本文： | 詹林盛,卓海龙,王会中,彭剑淳,王全立.丙型肝炎病毒 NS3 螺旋酶寡核苷酸 适配子的筛选与鉴定[J].生物化学与生物物理进展,2005,32(3):245-250. |
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| 作者姓名： | 詹林盛 卓海龙 王会中 彭剑淳 王全立 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院输血医学研究所,北京,100850 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30200352). |
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| 摘 要： | 为筛选和鉴定抗丙型肝炎病毒 (HCV) NS3 螺旋酶 (NS3h) 的寡核苷酸适配子 (aptamers). 利用 SELEX 技术，以 HCV NS3h 为靶分子，从体外合成的 81 bp 随机单链 DNA 文库中筛选与 HCV NS3h 特异结合的寡核苷酸适配子 . 克隆测序后，进行了解离常数 (Kd) 测定和 Clustal W 软件包分析适配子一级结构 . 经过 8 轮循环筛选，随机 ssDNA 库与 HCV NS3h 的结合率从 0.45% 上升到 29.5%. 所有的一级结构没有共同的同源序列，但可分 5 个家族，其中 4 个家族具有共同的保守序列 . 解离常数测定表明，寡核苷酸适配子 H2 与 HCV NS3h 特异结合的亲和力最高，Kd值为 140 nmol/L. 适配子 H2 (10 μmol/L) 在体外对 HCV NS3h 的活性具有一定的抑制作用，抑制率达 44%. 利用随机寡核苷酸文库获得了抗 HCV NS3h 的寡核苷酸适配子 .
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| 关 键 词： | 丙型肝炎病毒， NS3 螺旋酶， SELEX ， 寡核苷酸适配子 |
Screening and Characterization of Aptamers of Hepatitis C Virus NS3 Helicase |
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| ZHAN Lin-Sheng,ZHUO Hai-Long,WANG Hui-Zhong,PENG Jian-Chun and WANG Quan-Li.Screening and Characterization of Aptamers of Hepatitis C Virus NS3 Helicase[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2005,32(3):245-250. |
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| Authors: | ZHAN Lin-Sheng ZHUO Hai-Long WANG Hui-Zhong PENG Jian-Chun and WANG Quan-Li |
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| Institution: | Institute of Transfusion Medicine, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100850, China;Institute of Transfusion Medicine, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100850, China;Institute of Transfusion Medicine, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100850, China;Institute of Transfusion Medicine, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100850, China;Institute of Transfusion Medicine, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100850, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hepatitis C virus NS3 helicase SELEX aptamers |
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