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| 伪狂犬病病毒闽A株gE基因去信号肽片段在Pichia pastoris中的表达 | |
| 引用本文： | 敖敬群,王瑾雯,陈新华,王珣章,龙綮新,娄高明.伪狂犬病病毒闽A株gE基因去信号肽片段在Pichia pastoris中的表达[J].生物化学与生物物理进展,2003,30(4). |
| 作者姓名： | 敖敬群 王瑾雯 陈新华 王珣章 龙綮新 娄高明 |
| 作者单位： | 1. 中山大学生物防治国家重点实验室,广州,510275 2. 国家海洋局海洋生物遗传资源重点实验室,厦门,361005 3. 广东省兽医生物技术重点实验室,广州,510640 |
| 基金项目： | 国家科技攻关项目，国家自然科学基金 |
| 摘 要： | 伪狂犬病病毒囊膜糖蛋白E是一种在伪狂犬病根除计划中具有重要作用的糖蛋白.将伪狂犬病病毒闽A株gE基因去信号肽片段克隆到巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPICZαA中,获得的重组表达载体pPICZαA-FL电击转化野生型酵母菌SMD1168后,得到多株酵母工程菌SMD1168/pPICZαA-FL.经高浓度ZeocinTM筛选、表型鉴定、工程菌的诱导表达及表达产物的鉴定,最后得到高效表达gE基因去信号肽片段的酵母工程菌SMD1168/pPICZαA-FL-7.工程菌72 h培养上清的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳与蛋白质印迹结果显示,gE基因去信号肽片段表达产物大小约为80 ku,比预期的63.8 ku大.凝胶薄层扫描结合Bradford蛋白质总含量测定结果表明,表达产物占工程菌培养上清总蛋白的13.49%,表达量可达11.7 mg/L.间接ELISA结果表明重组表达产物具有良好的抗原性,能够有效地区分伪狂犬病病毒gE标准阳性与阴性血清. |
| 关 键 词： | 伪狂犬病病毒 gE基因去信号肽片段 Pichia pastoris表达系统 抗原性 |
Expression of gE Gene Fragment Deleted Signal Peptide of Pseudorabies Virus Fa Strain in Pichia pastoris |
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| Abstract: | |
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