一种新的末端转移酶活力测定法——荧光底物掺入法 |
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引用本文: | 张华,林卓坤,张军.一种新的末端转移酶活力测定法——荧光底物掺入法[J].生物化学与生物物理进展,1990,17(5):387-389. |
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作者姓名: | 张华 林卓坤 张军 |
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作者单位: | 南开大学生物系;南开大学生物系;南开大学生物系 |
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摘 要: | 本文介绍了一种末端脱氧核苷酰转移酶(TdT)活力的荧光底物掺入测定法。本法基于合成一种荧光物质εdATP(1,N-ethenodeoxyadenosine triphosphate)以代替放射性标记底物,在含εdATP与oligo(dA)25的反应体系中,使TdT催化εdATP加接至oligo(dA)25的3′-OH末端可得聚合产物,经分离、酶解后,测定游离εdATP的荧光强度并根据εdATP的掺入量测定TdT活力。方法简便、灵敏,测定范围较宽、重现性好及无需放射性底物。适用于临床定量检测白血病患者白细胞中TdT酶活力及基因工程中TdT工具酶活力的测定。
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关 键 词: | 荧光法 核苷酸 末端脱氧核苷酰转移酶 酶活力测定 |
收稿时间: | 1989/7/25 0:00:00 |
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