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激光捕获显微切割技术结合^18O标记定量蛋白质组技术在胃癌标志物筛查中的应用研究
引用本文:张志强,李茂玉,张桂英,彭芳,姚慧欣,李美香,肖志强,陈主初.激光捕获显微切割技术结合^18O标记定量蛋白质组技术在胃癌标志物筛查中的应用研究[J].生物化学与生物物理进展,2009,36(3).
作者姓名:张志强  李茂玉  张桂英  彭芳  姚慧欣  李美香  肖志强  陈主初
作者单位:1. 中南大学湘雅医院消化科,长沙,410008;新疆医科大学第一附属医院消化科,乌鲁木齐,830054
2. 中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室,长沙,410078
3. 中南大学湘雅医院消化科,长沙,410008
4. 中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室,长沙,410078;中南大学湘雅医学院肿瘤研究所,长沙,410008
基金项目:中南大学博士后科学基金,湖南省科技重大专项基金 
摘    要:建立一种更加精确地分离鉴定胃癌特异肿瘤标志物的定量蛋白质组学技术.首先采用激光捕获显微切割技术(LCM)纯化胃腺癌细胞及胃黏膜良性上皮细胞,将裂解的样本总蛋白经过1D SDS-PAGE预分离,然后采用17O/16O分别标记两种样本酶切后的多肽混合物.结合纳升级液相色谱(Nano-HPLC-MS/MS)定量地鉴定胃癌细胞和胃黏膜良性上皮细胞的差异表达蛋白.共筛选出78个差异表达蛋白,其中42个蛋白质在胃癌组织中表达上调,36个蛋白质下调.Western blot技术验证了其中几个差异蛋白(moesin,periostin,annexin A2,annexin A4)的表达,与蛋白质组学研究的结果一致.LOM技术结合18O稳定同位素标记的定量蛋白质组学技术,为研究胃癌发生机制、筛选胃癌的分子标志物提供了新的思路,亦为诸如胃癌等复杂体系蛋白质的分离鉴定提供了新的技术选择.

关 键 词:胃癌  激光捕获显微切割  定量蛋白质组学  18O标记

Quantitative proteome Analysis of Clinical Gastric adenocarcinoma Using 18O Stable Isotope Labeling and LCM
ZHANG Zhi-Qiang,LI Mao-Yu,ZHANG Gui-Ying,PENG Fang,YAO Hui-Xin,LI Mei-Xiang,XIAO Zhi-Qiang,CHEN Zhu-Chu.Quantitative proteome Analysis of Clinical Gastric adenocarcinoma Using 18O Stable Isotope Labeling and LCM[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2009,36(3).
Authors:ZHANG Zhi-Qiang  LI Mao-Yu  ZHANG Gui-Ying  PENG Fang  YAO Hui-Xin  LI Mei-Xiang  XIAO Zhi-Qiang  CHEN Zhu-Chu
Abstract:
Keywords:
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