| 人心肌肌钙蛋白I-C融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化 |
| |
| 引用本文： | 闫存玲,徐国宾,夏铁安.人心肌肌钙蛋白I-C融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化[J].生物化学与生物物理进展,2004,31(9):812-817. |
| |
| 作者姓名： | 闫存玲 徐国宾 夏铁安 |
| |
| 作者单位： | 北京大学第一医院检验科,北京,100034 |
| |
| 摘 要： | 提取人心肌组织总RNA，RT-PCR扩增出人心肌肌钙蛋白I（cardiac troponin I，cTnI）和肌钙蛋白C（TnC）基因，利用人工合成的可编码19个中性氨基酸残基为主的DNA序列（Linker），将cTnI和TnC基因连接，插入到质粒pET15b中，将鉴定正确的重组pET15b质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中，用异丙基-β-D–硫代半乳糖苷（IPTG）诱导蛋白质表达.结果在大肠杆菌中成功实现了全长cTnI-C融合蛋白（cTnI-linker-TnC）的稳定可溶性高表达，在摇瓶中表达量可达21 mg/L.利用目的蛋白N端的组氨酸“标签”（His-tag），经一步Ni2+-Sepharose柱亲和层析纯化，得到了聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)纯蛋白质.经初步研究，cTnI-C具有较好的免疫原性和稳定性，有望成为cTnI测定系统可溯源的候选参考物质，推进cTnI检测的标准化进程.
|
| 关 键 词： | 心肌肌钙蛋白I-C，融合蛋白，表达 纯化 |
| 收稿时间： | 2004/3/11 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2004/4/28 0:00:00 |
Expression of Human Cardiac Troponin I-C in E.coli and Its Purification |
| |
| YAN Cun-Ling,XU Guo-Bin and XIA Tie-An.Expression of Human Cardiac Troponin I-C in E.coli and Its Purification[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2004,31(9):812-817. |
| |
| Authors: | YAN Cun-Ling XU Guo-Bin and XIA Tie-An |
| |
| Institution: | Department of Laboratory Medical Science, Peking University First Hospital,Beijing 100034, China;Department of Laboratory Medical Science, Peking University First Hospital,Beijing 100034, China;Department of Laboratory Medical Science, Peking University First Hospital,Beijing 100034, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | cardiac troponin I- C fusion protein expression purification |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《生物化学与生物物理进展》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《生物化学与生物物理进展》下载免费的PDF全文 |
