| 含蛋白质转导域的Ngb融合蛋白的原核表达、纯化及其生物学活性的初步研究 |
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| 引用本文： | 周国钰,周盛年,楼之茵,朱灿胜,胡学强.含蛋白质转导域的Ngb融合蛋白的原核表达、纯化及其生物学活性的初步研究[J].生物化学与生物物理进展,2007,34(6):634-641. |
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| 作者姓名： | 周国钰 周盛年 楼之茵 朱灿胜 胡学强 |
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| 作者单位： | 1. 中山大学附属第三医院神经病学科,广州,510630
2. 山东大学齐鲁医院神经内科,济南,250012 |
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| 基金项目： | 国家"211"工程建设项目 |
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| 摘 要： | 以SD大鼠脑组织RNA为模板,利用RT-PCR技术,将HIV-1反式激活蛋白(TAT)中具有蛋白质转导功能的9个氨基酸序列,即蛋白质转导域(PTD)基因与脑红蛋白(Ngb)基因融合,应用T-A克隆技术将融合基因与pMD19-Tsimple载体连接,经测序正确后克隆至表达载体pET28b中,转化感受态E.coli BL21(DE3)plysS,得到的转化子经IPTG诱导后获得可溶性表达,并经蛋白质印迹检测进一步鉴定.表达产物经Ni2 亲和纯化层析、脱盐后在原代培养的大鼠皮质神经元进行生物学活性检测,结果显示,TATPTD-Ngb融合蛋白可以转运入皮质神经元内,在48h内可检测到其存在,并能提高缺氧条件下皮质神经元存活率、减少缺氧诱导的皮质神经元的凋亡.这一结果为进一步研究TATPTD-Ngb的神经保护机制提供了线索,并可能为神经系统疾病尤其是脑血管疾病、神经系统退行性疾病提供一个新的治疗策略.
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| 关 键 词： | 蛋白质转导 脑红蛋白 蛋白质治疗 |
| 收稿时间： | 2006/12/13 0:00:00 |
| 修稿时间： | 4/4/2007 12:00:00 AM |
Prokaryotic Expression, Purification of Ngb Fusion Protein Containing Protein Transduction Domain and Its Biologic activity |
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| ZHOU Guo-Yu,ZHOU Sheng-Nian,LOU Zhi-Yin,ZHU Can-Sheng and HU Xue-Qiang.Prokaryotic Expression, Purification of Ngb Fusion Protein Containing Protein Transduction Domain and Its Biologic activity[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2007,34(6):634-641. |
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| Authors: | ZHOU Guo-Yu ZHOU Sheng-Nian LOU Zhi-Yin ZHU Can-Sheng and HU Xue-Qiang |
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| Institution: | Department of Neurology, The Third Affiliated Hospital, Sun Yat-Sen University, Guangzhou 510630, China;Department of Neurology, Qilu Hospital, Shandong University, Jinan 250012, China;Department of Neurology, The Third Affiliated Hospital, Sun Yat-Sen University, Guangzhou 510630, China;Department of Neurology, The Third Affiliated Hospital, Sun Yat-Sen University, Guangzhou 510630, China;Department of Neurology, The Third Affiliated Hospital, Sun Yat-Sen University, Guangzhou 510630, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | protein transduction neuroglobin protein therapy |
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