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基于TaqMan实时荧光定量PCR技术的西花蓟马快速检测
引用本文:吴霞,张桂芬,万方浩.基于TaqMan实时荧光定量PCR技术的西花蓟马快速检测[J].昆虫知识,2011,48(3):497-503.
作者姓名:吴霞  张桂芬  万方浩
作者单位:1. 中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京,100193
2. 中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京,100193;农业部外来入侵生物预防与控制研究中心,北京,100081
基金项目:国家"973"计划项目,公益性行业(农业)科研专项,国家自然科学基金
摘    要:西花蓟马Frankliniella occidentalis(Pargande)是世界性害虫,2003年在我国首次发生危害。针对西花蓟马与其他种类蓟马形态相似、难以快速区分的问题,本文在SCAR标记基础上,采用TaqMan实时荧光定量PCR技术,设计1对特异性引物和1条MGB探针,扩增出大小为138bp的特异片段。以质粒DNA为标准品建立了标准曲线(R2=0.9965),种特异性检验结果显示,该引物和探针只能检测到西花蓟马的荧光信号,而对其他种类的蓟马不具有检测能力。并且可以定量检测西花蓟马不同虫态靶标DNA片段的拷贝数。该检测体系重复性强、稳定性高,在口岸检疫以及植物种苗及其产品调运中的有害生物检测和监测中具有重要意义。

关 键 词:西花蓟马  TaqMan-MGB探针  实时荧光定量PCR  快速检测  SCAR标记

TaqMan real-time fluorescent quantitative PCR for identification of Frankliniella occidentalis
WU Xia,ZHANG Gui-Fen,WAN Fang-Hao.TaqMan real-time fluorescent quantitative PCR for identification of Frankliniella occidentalis[J].Entomological Knowledge,2011,48(3):497-503.
Authors:WU Xia  ZHANG Gui-Fen  WAN Fang-Hao
Institution:WU Xia1 ZHANG Gui-Fen1,2 WAN Fang-Hao1,2(1.State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests,Institute of Plant Protection,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100193,China,2.Center for Management of Invasive Alien Species,Ministry of Agriculture,Beijing 100081,China)
Abstract:The western flower thrip,Frankliniella occidentalis (Pargande),an invasive species worldwide,was first reported in Beijing in 2003.Morphological identification of thrips is difficult because of their small size,high degree of similarity,and polymorphism.In contrast,molecular identification is not hindered by phenotypic polymorphism,or the sex or stage of development of the target species.We evaluated the effectiveness of TaqMan real-time fluorescent quantitative PCR to identify WFT,for which we developed a ...
Keywords:Frankliniella occidentalis  TaqMan-MGB  real-time fluorescent quantitative PCR  rapid detection  SCAR marker  
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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