| 应用环介导等温扩增技术(LAMP)快速检测家蚕核型多角体病毒的研究 |
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| 引用本文： | 唐芬芬,杨伟克,邵榆岚,谢道燕,廖鹏飞,杨海,白兴荣.应用环介导等温扩增技术(LAMP)快速检测家蚕核型多角体病毒的研究[J].昆虫知识,2013,50(4):1013-1019. |
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| 作者姓名： | 唐芬芬 杨伟克 邵榆岚 谢道燕 廖鹏飞 杨海 白兴荣 |
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| 作者单位： | 云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所 蒙自 661101 |
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| 基金项目： | 云南省现代农业产业技术体系建设专项，云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所青年基金项目 |
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| 摘 要： | 由家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopoyhedrosis virus,BmNPV)侵染家蚕Bombyx mori引起的家蚕核型多角体病(血液型脓病)在养蚕生产中发生较为普遍,对蚕业生产造成重大的经济损失。本研究建立了快捷有效的环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)用于快速检测BmNPV,为蚕业生产提供了一个有效检测BmNPV和进行早期诊断的技术。该方法是针对BmNPV的pe38基因的6个区段设计的6条引物用于扩增检测,整个反应在恒温条件63℃下进行25 min,扩增产物用电泳法和可视法检测(用SYBR Green I染色)。结果显示,LAMP检测方法的灵敏度是常规PCR方法的100倍,能检测的范围为21个拷贝。另外,用4.86×108OBs/mL感染4龄起蚕,提取血淋巴DNA为模板,PCR在感染36 h后检出病毒DNA,LAMP法能检测感染12h后的样品。
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| 关 键 词： | 家蚕核型多角体病毒 环介导等温扩增技术 早期诊断 蚕业 |
Prompt diagnosis of the Bombyx mori nucleopolyhedrosis virus by loop-mediated isothermal amplification |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bombyx mori nucleopoyhedrosis virus (BmNPV) loop-mediated isothermal amplification (LAMP) diognosis sericulture |
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