| 小菜蛾PGRP-SA的体外表达及介导酚氧化酶活力的研究 |
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| 引用本文： | 张玉清,许小霞,郑志华,余静,高延富,欧阳莉娜,金丰良.小菜蛾PGRP-SA的体外表达及介导酚氧化酶活力的研究[J].环境昆虫学报,2016(3):572-581. |
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| 作者姓名： | 张玉清 许小霞 郑志华 余静 高延富 欧阳莉娜 金丰良 |
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| 作者单位： | 华南农业大学农学院昆虫学系,广东省生物农药创制与应用重点实验室,广州510642 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30900943;1071734)，广州市科技计划项目(201509010023) |
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| 摘 要： | 肽聚糖识别蛋白(Peptidoglycan Recognition Proteins,PGRPs)是可以识别肽聚糖和含肽聚糖的细菌的一类模式识别受体,在介导酚氧化酶级联反应中起着重要的作用。本研究以实验室克隆的小菜蛾Px PGRP-SA(Gen Bank No.EU399240)为基础,RT-PCR克隆了其开放阅读框(ORF),在原核细胞中获得了高效重组表达,利用GST一步纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备了抗血清,滴定效价为1∶51200。Western blot检测表明Micrococcus luteus和Serratia marcescens可以显著提高Px PGRP-SA在小菜蛾血淋巴中的含量。为了检测Px PGRP-SA与酚氧化酶PO的活力关系,本研究将Px PGRP-SA连接到真核表达载体p MT/Bip/V5/His A构建真核表达质粒p MTAPGRP,转染果蝇S2细胞中,获得稳定的细胞系,硫酸铜诱导获得表达后用anti-V5纯化获得重组蛋白Px PGRP-SA。将重组蛋白Px PGRP-SA与M.luteus和S.marcescens分别温育后,可以显著提高小菜蛾血浆中PO的活力。本研究结果阐明了重组蛋白Px PGRP-SA在小菜蛾体PO级联反应中的功能,为进一步研究Px PGRP-SA在小菜蛾体内免疫信号通路中的功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 小菜蛾 肽聚糖识别蛋白 酚氧化酶 细胞表达 |
The research of PGRP-SA's expression in vitro and its involving in phenoloxidase activity from Plutella xylostella |
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| ZHANG Yu-Qing,XU Xiao-Xi,ZHENG Zhi-Hu,YU Jing,Gao Yan-Fu,OUYANG Li-N,JIN Feng-Liang.The research of PGRP-SA''s expression in vitro and its involving in phenoloxidase activity from Plutella xylostella[J].Journal of Environmental Entomology,2016(3):572-581. |
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| Authors: | ZHANG Yu-Qing XU Xiao-Xi ZHENG Zhi-Hu YU Jing Gao Yan-Fu OUYANG Li-N JIN Feng-Liang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Plutella xylostella Peptidoglycan Recognition Protein (PGRPs) Phenoloxidase (Po) cell expression |
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