| 斜纹夜蛾ppie基因的克隆及表达载体构建 |
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| 引用本文： | 俞丹,张潘,胡艳,许翠仙,张斌月,李明.斜纹夜蛾ppie基因的克隆及表达载体构建[J].环境昆虫学报,2019,41(1). |
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| 作者姓名： | 俞丹 张潘 胡艳 许翠仙 张斌月 李明 |
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| 作者单位： | 云南大学生命科学学院,云南省高校动物遗传多样性和进化重点实验室,昆明650091;云南大学生命科学学院,云南省高校动物遗传多样性和进化重点实验室,昆明650091;云南大学生命科学学院,云南省高校动物遗传多样性和进化重点实验室,昆明650091;云南大学生命科学学院,云南省高校动物遗传多样性和进化重点实验室,昆明650091;云南大学生命科学学院,云南省高校动物遗传多样性和进化重点实验室,昆明650091;云南大学生命科学学院,云南省高校动物遗传多样性和进化重点实验室,昆明650091 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 肽基脯氨酰基顺反异构酶E (Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase E, PPIE)是亲环蛋白家族的成员之一,具有肽基脯氨酰基顺反异构酶(Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase, PPIase)活性,能与亲环蛋白抑制剂CsA特异性结合。PPIE具有两个结构域:N-端的RNA识别域(RNA Recognition Motif, RRM)和C-端的PPIase活性域。PPIE和其他亲环蛋白一样,具有蛋白质折叠功能。研究表明,哺乳动物细胞中的PPIE能抑制流感病毒复制,能与MLL PHD3相互结合。但昆虫细胞中PPIE的功能研究较少。本文以斜纹夜蛾Spodoptera litura为研究对象,克隆得到ppie基因,通过生物信息学分析发现,斜纹夜蛾ppie基因ORF全长876 bp,共编码291个氨基酸,具有亲环蛋白家族标签:YQGSlFHRIIPDFMCQGG。构建了真核表达载体pIZT/V5-His-ppie,结果证明,构建的真核表达载体能在昆虫细胞中表达,融合蛋白大小为36 kDa左右,与预测大小一致。还通过免疫荧光实验确定,PPIE定位于细胞核中,与前人研究报道一致。本文研究内容将为进一步研究斜纹夜蛾PPIE功能奠定基础。
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| 关 键 词： | 亲环蛋白 斜纹夜蛾 肽基脯氨酰基顺反异构酶 PPIE 克隆 |
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