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人颗粒裂解肽片段在大肠杆菌中的表达
引用本文:李邦印,王臻,李大伟,张灵霞,王治伟.人颗粒裂解肽片段在大肠杆菌中的表达[J].生物技术通讯,2007,18(5):750-752.
作者姓名:李邦印  王臻  李大伟  张灵霞  王治伟
作者单位:1. 解放军总医院,第二附属医院,北京,100091
2. 解放军总医院,第二附属医院,北京,100091;江西农业大学,动科院,江西,南昌,330045
摘    要:目的:建立颗粒裂解肽(NKG5)的原核表达载体系统,并在大肠杆菌中获得表达。方法:采用寡核苷酸合成、PCR扩增得到NKG5编码序列,克隆到pGEM-T载体上,经测序正确后,再切下编码序列连接到重组表达载体pGEx-4T-1中,转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导重组工程菌表达,采用谷胱甘肽偶联的Sepharose 4B纯化重组蛋白。结果:重组菌株可以表达GST-NKG5融合蛋白,用免疫印迹反应鉴定纯化的融合蛋白,在相对分子质量34000处有一条带。结论:获得了在大肠杆菌中低表达的颗粒裂解肽融合蛋白,为后续研究奠定了基础。

关 键 词:颗粒裂解肽  融合蛋白  原核表达
文章编号:1009-0002(2007)05-0750-03
修稿时间:2007-02-05

Expression of Optimised DNA Fragment Encoding Human NKG5 in Escherichia coli
LI Bang-yin,LI Da-wei,WANG Zhen,ZHANG Ling-xia,WANG Zhi-wei.Expression of Optimised DNA Fragment Encoding Human NKG5 in Escherichia coli[J].Letters in Biotechnology,2007,18(5):750-752.
Authors:LI Bang-yin  LI Da-wei  WANG Zhen  ZHANG Ling-xia  WANG Zhi-wei
Institution:The Second Affiliated Hospital, PLA General Hospital, Beijing 100091, China
Abstract:
Keywords:NKG5  fusion protein  prokaryotic expression
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