4E-BP1、4E-BP1-4A 重组慢病毒载体的构建及对胃癌细胞 HGC27生长的影响 |
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引用本文: | 罗国兰,王洪涛,伍飞马,李海量,张晓清,薛萌,王健,李山虎,赵亚丽,刘萱,周建光.4E-BP1、4E-BP1-4A 重组慢病毒载体的构建及对胃癌细胞 HGC27生长的影响[J].生物技术通讯,2013,0(2):193-196. |
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作者姓名: | 罗国兰 王洪涛 伍飞马 李海量 张晓清 薛萌 王健 李山虎 赵亚丽 刘萱 周建光 |
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作者单位: | 1. 广西医科大学,广西 南宁 530021 2. 军事医学科学院 生物工程研究所,北京 100850 |
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摘 要: | 目的:构建4E-BP1及其 T37A、T46A、S65A、T70A 突变体4E-BP1-4A 基表达的重组慢病毒载体,研究其对胃癌 HGC27细胞生长的影响.方法:PCR 扩增4E-BP1基及其突变体4E-BP1-4A 基并克隆到 pCDH 载体,构建成 pCDH-4E-BP1、pCDH-4E-BP1-4A,将其与包装载体共转染293T 细胞,包装成 Lenti-4E-BP1及 Lenti-4E-BP1-4A重组慢病毒载体,将此慢病毒感染胃癌 HGC27细胞,Western 印迹鉴定病毒载体介导的4E-BP1、4E-BP1-4A 蛋白的表达,MTT、克隆形成和软琼脂方法研究过量表达4E-BP1、4E-BP1-4A 对胃癌 HGC27细胞生长的影响.结果:包装成 Lenti-4E-BP1及 Lenti-4E-BP1-4A 重组慢病毒载体,并将此慢病毒载体感染胃癌 HGC27细胞;MTT、克隆形成、软琼脂实验表明过量表达4E-BP1可抑制胃癌 HGC27细胞的生长,过量表达4E-BP1-4A 时抑制效果更明显.结论:构建了4E-BP1、4E-BP1-4A 的重组慢病毒表达载体,在胃癌 HGC27细胞中过量表达4E-BP1可抑制细胞生长,过量表达4E-BP1-4A 的抑制效果更明显.
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关 键 词: | 4E-BP1 4E-BP1-4A 慢病毒载体 胃癌 细胞生长 |
Construction of Recombinant Lentiviral Vector for Overexpression of 4E-BP1, 4E-BP1-4A and Their Effects on the Growth of HGC27 Gastric Cancer Cells |
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Abstract: | |
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Keywords: | 4E-BP1 4E-BP1-4A lentivirus vector gastric cancer cell growth |
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