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4E-BP1、4E-BP1-4A 重组慢病毒载体的构建及对胃癌细胞 HGC27生长的影响
引用本文:罗国兰,王洪涛,伍飞马,李海量,张晓清,薛萌,王健,李山虎,赵亚丽,刘萱,周建光.4E-BP1、4E-BP1-4A 重组慢病毒载体的构建及对胃癌细胞 HGC27生长的影响[J].生物技术通讯,2013,0(2):193-196.
作者姓名:罗国兰  王洪涛  伍飞马  李海量  张晓清  薛萌  王健  李山虎  赵亚丽  刘萱  周建光
作者单位:1. 广西医科大学,广西 南宁 530021
2. 军事医学科学院 生物工程研究所,北京 100850
摘    要:目的:构建4E-BP1及其 T37A、T46A、S65A、T70A 突变体4E-BP1-4A 基表达的重组慢病毒载体,研究其对胃癌 HGC27细胞生长的影响.方法:PCR 扩增4E-BP1基及其突变体4E-BP1-4A 基并克隆到 pCDH 载体,构建成 pCDH-4E-BP1、pCDH-4E-BP1-4A,将其与包装载体共转染293T 细胞,包装成 Lenti-4E-BP1及 Lenti-4E-BP1-4A重组慢病毒载体,将此慢病毒感染胃癌 HGC27细胞,Western 印迹鉴定病毒载体介导的4E-BP1、4E-BP1-4A 蛋白的表达,MTT、克隆形成和软琼脂方法研究过量表达4E-BP1、4E-BP1-4A 对胃癌 HGC27细胞生长的影响.结果:包装成 Lenti-4E-BP1及 Lenti-4E-BP1-4A 重组慢病毒载体,并将此慢病毒载体感染胃癌 HGC27细胞;MTT、克隆形成、软琼脂实验表明过量表达4E-BP1可抑制胃癌 HGC27细胞的生长,过量表达4E-BP1-4A 时抑制效果更明显.结论:构建了4E-BP1、4E-BP1-4A 的重组慢病毒表达载体,在胃癌 HGC27细胞中过量表达4E-BP1可抑制细胞生长,过量表达4E-BP1-4A 的抑制效果更明显.

关 键 词:4E-BP1  4E-BP1-4A  慢病毒载体  胃癌  细胞生长

Construction of Recombinant Lentiviral Vector for Overexpression of 4E-BP1, 4E-BP1-4A and Their Effects on the Growth of HGC27 Gastric Cancer Cells
Abstract:
Keywords:4E-BP1  4E-BP1-4A  lentivirus vector  gastric cancer  cell growth
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