| 丙型肝炎病毒ns3区全长基因在大肠杆菌中的高效表达及纯化 |
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| 引用本文： | 杨敬,薛小平,雷迎峰,尹文,吕欣,徐志凯.丙型肝炎病毒ns3区全长基因在大肠杆菌中的高效表达及纯化[J].生物技术通讯,2005,16(1):13-15. |
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| 作者姓名： | 杨敬 薛小平 雷迎峰 尹文 吕欣 徐志凯 |
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| 作者单位： | 第四军医大学,微生物学教研室,陕西,西安,710032 |
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| 摘 要： | 利用PCR技术扩增HCV ns3基因，经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后与原核表达质粒pProEX—HTb连接，转化感受态细胞Ecoli DH50α，酶切鉴定得阳性重组质粒pProEX—HTb—ns3并测序；pProEX—HTb—ns3转化宿主细胞获得工程菌，用IPTG诱导，获得NS3蛋白的高效表达，薄层扫描显示其占菌体总蛋白的35％；目的蛋白在变性条件下经Ni^2 -NTA凝胶亲和层析纯化，透析并浓缩后用丙型肝炎患阳性血清做为一抗行Western—Blot证实特异性和抗原性。结果成功表明，诱导表达产物主要以包涵体形式存在；6His—NTA纯化后获得目的蛋白，Western—blot结果显示纯化蛋白具有良好的抗原性。HCVNS3蛋白的高效表达及纯化，为利用NS3蛋白作为诊断抗原及制备单克隆抗体奠定了基础。
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| 关 键 词： | 丙型肝炎病毒 非结构区 原核表达 纯化 抗原性 ns3基因 |
| 文章编号： | 1009-0002(2005)01-0013-03 |
| 修稿时间： | 2004年7月21日 |
Highly Efficent Expression and Purification of HCV ns3 Gene in E.coli |
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| YANG Jing,XUE Xiao-ping,LEI Ying-feng,YIN Wen,LV Xin,XU Zhi-kai.Highly Efficent Expression and Purification of HCV ns3 Gene in E.coli[J].Letters in Biotechnology,2005,16(1):13-15. |
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| Authors: | YANG Jing XUE Xiao-ping LEI Ying-feng YIN Wen LV Xin XU Zhi-kai |
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| Institution: | YANG Jing,XUE Xiao-ping,LEI Ying-feng,YIN Wen,LV Xin,XU Zhi-kaiDepartment of Microbiology,Fourth Military Medical University,Xi'an 710032,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hepatitis C virus non-structure 3 protein prokaryotic expression purification |
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