| p300基因小干扰RNA慢病毒载体的构建及其对乳腺癌ZR75-1细胞的影响 |
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| 引用本文： | 陈志达,丁丽华,张亚楠,刘婕,朱杰,叶棋浓,卫勃.p300基因小干扰RNA慢病毒载体的构建及其对乳腺癌ZR75-1细胞的影响[J].生物技术通讯,2014,25(5). |
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| 作者姓名： | 陈志达 丁丽华 张亚楠 刘婕 朱杰 叶棋浓 卫勃 |
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| 作者单位： | 1. 解放军总医院普通外科,北京,100853
2. 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，北京市科技新星计划 |
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| 摘 要： | 目的:构建p300基因的小干扰RNA(siRNA)慢病毒表达载体,检测其对p300蛋白表达的干扰,以及对乳腺癌细胞ZR75-1生长的影响。方法:利用RNA干扰(RNAi)技术设计并合成针对p300基因的siRNA,并将其克隆到siRNA表达载体pSIH-H1上,经酶切和测序验证,用293T人胚肾细胞包装p300 siRNA慢病毒,感染乳腺癌细胞ZR75-1,建立敲低p300表达的稳定细胞株,通过实时定量PCR和Western印迹检验RNAi的干扰效果,利用细胞生长实验检测p300 siRNA对ZR75-1细胞生长的影响。结果:酶切和测序证明构建了p300 siRNA真核表达载体;实时定量PCR和Western印迹证明构建的siRNA能有效抑制p300基因的表达,并建立了敲低p300表达的稳定细胞株;细胞生长实验证实p300 siRNA可有效促进ZR75-1细胞的生长。结论:构建了p300基因的siRNA真核表达载体,转染细胞后能有效抑制p300基因的表达,且能促进ZR75-1细胞的生长,表明构建的p300 siRNA具有功能。
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| 关 键 词： | p300基因 小干扰RNA 慢病毒载体 |
Lentiviral Vector for p300 Small-Interfering RNA and its Effect on Breast Cancer ZR75-1 Cell Growth |
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| CHEN Zhi-Da,DING Li-Hua,ZHANG Ya-Nan,LIU Jie,ZHU Jie,YE Qi-Nong,WEI Bo.Lentiviral Vector for p300 Small-Interfering RNA and its Effect on Breast Cancer ZR75-1 Cell Growth[J].Letters in Biotechnology,2014,25(5). |
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| Authors: | CHEN Zhi-Da DING Li-Hua ZHANG Ya-Nan LIU Jie ZHU Jie YE Qi-Nong WEI Bo |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | p300 gene small-interfering RNA lentiviral vector |
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