| 小鼠层粘连蛋白α5链LG1-3组件的原核表达及多克隆抗体制备 |
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| 引用本文： | 展德文,张玉静,刘昌,袁盛凌,刘纯杰,张兆山.小鼠层粘连蛋白α5链LG1-3组件的原核表达及多克隆抗体制备[J].生物技术通讯,2007,18(2):233-235. |
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| 作者姓名： | 展德文 张玉静 刘昌 袁盛凌 刘纯杰 张兆山 |
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| 作者单位： | 1. 军事医学科学院,生物工程研究所,北京,100071
2. 吉林大学(和平校区)生物化学教研室,吉林,长春,130062 |
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| 摘 要： | 目的:用原核表达的方法获得带有6个His标记的小鼠层粘连蛋白α5链LG1-3组件的重组蛋白,并制备其多克隆抗体。方法:利用RT-PCR技术,从小鼠心肌组织中扩增出小鼠层粘连蛋白α5链LG1-3组件cDNA片段,将该片段与原核表达载体pET-28a连接,构建重组表达质粒pETLG1-3并转化大肠杆菌BL21(DE3)获得重组表达菌株。用IPTG诱导重组大肠杆菌BL21(DE3)/pETLG1-3表达,SDS-PAGE分析表明在相对分子质量60000处有特异性重组蛋白表达条带,并经Western印迹进一步鉴定。用含融合蛋白的聚丙烯酰胺凝胶颗粒免疫家兔,制备抗小鼠层粘连蛋白α5链LG1-3组件多克隆抗体,ELISA方法检测抗体滴度。结果:从小鼠心肌组织中克隆了层粘连蛋白α5链LG3组件的基因,并在大肠杆菌得以表达和纯化;制备了重组蛋白的多克隆抗体,其滴度可达到1∶10240。结论:小鼠层粘连蛋白α5链LG1-3组件重组蛋白及其多克隆抗体的获得,为后续研究其功能打下了基础。
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| 关 键 词： | 小鼠 层粘连蛋白α5链 表达 多克隆抗体 |
| 文章编号： | 1009-0002（2007）02-0233-03 |
| 修稿时间： | 2006-07-31 |
Expression of Mouse Laminin α5 LG1-3 Module in Escherichia coli and Preparation of its Polyclonal Antibody |
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| ZHAN De-wen,ZHANG Yu-jing,LIU Chang,YUAN Sheng-ling,LIU Chun-jie,ZHANG Zhao-shan.Expression of Mouse Laminin α5 LG1-3 Module in Escherichia coli and Preparation of its Polyclonal Antibody[J].Letters in Biotechnology,2007,18(2):233-235. |
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| Authors: | ZHAN De-wen ZHANG Yu-jing LIU Chang YUAN Sheng-ling LIU Chun-jie ZHANG Zhao-shan |
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| Institution: | 1. Beijing Institute of Biotechnology, Beijing 100071; 2. YUAN Sheng-linga, LIU Chun-jie1, ZHANG Zhao-shan1 Department of Biochemistry and Molecular Biology, Jilin University Changchun 130062; China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | LG1-3 |
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