| 表达萤光素酶的HIV药物筛选细胞模型的建立 |
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| 引用本文： | 张昕,安小平,陈斌,张宝中,王盛,刘大斌,童贻刚.表达萤光素酶的HIV药物筛选细胞模型的建立[J].生物技术通讯,2010,21(5):666-669. |
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| 作者姓名： | 张昕 安小平 陈斌 张宝中 王盛 刘大斌 童贻刚 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院,微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京,100071 |
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| 摘 要： | 目的:构建基于萤光素酶的单次复制人免疫缺陷病毒(HIV)细胞模型,用于抗HIV药物的筛选。方法:构建含萤光素酶报告基因的假型慢病毒质粒,将疱疹性口炎病毒外膜糖蛋白(VSV-G)的表达质粒、HIV-1 Rev蛋白表达质粒、HIV Gag-Pol蛋白表达质粒和含萤光素酶报告基因的重组慢病毒质粒共转染HEK 293FT细胞,制备假型慢病毒;在假型慢病毒生产和再感染新鲜HEK 293FT细胞的过程中加入逆转录酶和蛋白酶抑制剂(如AZT),检测再感染的细胞中萤光素酶的表达水平,从而判断药物对HIV的抑制作用。结果:构建了含萤光素酶报告基因的重组慢病毒质粒pLenti-Luc;利用已知抗HIV药物AZT进行测试,发现HIV药物处理组细胞中萤光素酶活性远低于对照组。结论:建立了基于萤光素酶的HIV药物筛选细胞模型,该系统使用单次复制的报告病毒,具有良好的安全性,而使用萤光素酶基因作为报告基因使该系统具备极高的敏感性,该系统适合于进行高通量药物筛选。
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| 关 键 词： | 人免疫缺陷病毒 假型慢病毒 单次复制 药物筛选 |
Construction of an Anti-HIV Drug-Screening Cell Model Using Luciferase as a Reporter |
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| ZHANG Xin,AN Xiao-Ping,CHEN Bin,ZHANG Bao-Zhong,WANG Sheng,LIU Da-Bin,TONG Yi-Gang.Construction of an Anti-HIV Drug-Screening Cell Model Using Luciferase as a Reporter[J].Letters in Biotechnology,2010,21(5):666-669. |
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| Authors: | ZHANG Xin AN Xiao-Ping CHEN Bin ZHANG Bao-Zhong WANG Sheng LIU Da-Bin TONG Yi-Gang |
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| Institution: | State Key Laboratory of Pathogen and Biosecurity,Institute of Microbiology and Epidemiology,Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100071,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human immunodeficiency virus pseudo-typed lentivirus singly cycle replication drug screening |
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