| 类风湿性关节炎成纤维样滑膜(FLS)细胞中DDR2相互作用分子的筛选鉴定及其对FLS细胞侵袭能力的影响 |
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| 引用本文： | 刘楠楠,赵薇,穆楠,田菲,薛晓畅,颜真,张伟.类风湿性关节炎成纤维样滑膜(FLS)细胞中DDR2相互作用分子的筛选鉴定及其对FLS细胞侵袭能力的影响[J].生物技术通讯,2015(3):305-310. |
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| 作者姓名： | 刘楠楠 赵薇 穆楠 田菲 薛晓畅 颜真 张伟 |
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| 作者单位： | 第四军医大学基础部教学实验中心;宁夏医科大学生物化学与分子生物学系;第四军医大学药学院生物制药学教研室 |
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| 摘 要： | 目的:在类风湿性关节炎(RA)成纤维样滑膜(FLS)细胞中筛选并鉴定盘状结构域受体2(DDR2)的相互作用蛋白,并研究其对FLS细胞侵袭能力的影响。方法:首先利用免疫沉淀结合SDS-PAGE分离鉴定DDR2互作蛋白波形蛋白,进而采用免疫沉淀和激光共聚焦实验,进一步验证波形蛋白是DDR2的相互作用蛋白,最后采用Transwell实验考察波形蛋白对RA FLS细胞侵袭能力的影响。结果:Ⅱ型胶原刺激引起RA FLS细胞中DDR2的磷酸化水平升高,DDR2被活化,活化前后共有8个DDR2相互作用蛋白发生变化,经质谱分析,其中变化最大的是波形蛋白和膜联蛋白A2;在HEK293T细胞中,免疫共沉淀结果显示Fc DDR2与波形蛋白存在相互作用;激光共聚焦结果显示在RA FLS细胞中,DDR2和波形蛋白存在共定位;下调RA FLS细胞中波形蛋白的表达后,细胞的侵袭能力较对照组显著下降。结论:波形蛋白是DDR2的相互作用蛋白,Ⅱ型胶原可引起RA FLS细胞的DDR2磷酸化水平升高,并通过波形蛋白促进RA FLS细胞的侵袭。
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| 关 键 词： | 类风湿性关节炎 盘状结构域受体2 波形蛋白 成纤维样滑膜细胞 |
Effect of DDR2 Interaction Protein Vimentin in the Invasion of Rheumatoid Arthritis Fibroblast-Like Synovial Cells |
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