| 人骨形成蛋白-7成熟肽基因在巴斯德毕氏酵母中的分泌表达 |
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| 引用本文： | 刘蕾,王慧,颜光涛,史晶,包士中,荫俊.人骨形成蛋白-7成熟肽基因在巴斯德毕氏酵母中的分泌表达[J].生物技术通讯,2006,17(6):862-864. |
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| 作者姓名： | 刘蕾 王慧 颜光涛 史晶 包士中 荫俊 |
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| 作者单位： | 1. 中国人民解放军总医院,基础所生化室,北京,100853
2. 军事医学科学院,微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京,100071 |
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| 摘 要： | 目的:利用甲醇酵母表达系统,构建重组人骨形成蛋白-7(rhBMP-7)成熟肽的基因工程菌,并实现其分泌表达。方法:采用PCR方法,依据GenBank数据库中hBMP-7成熟肽序列(AccessionNo.NM_001719)设计并合成一对引物,从已构建的含hBMP-7的克隆载体中扩增获得人骨形成蛋白-7成熟肽基因片段,并以pPIC9K为表达载体构建重组表达质粒,电转化巴斯德毕氏酵母SMD1168,于30℃进行甲醇诱导分泌表达,经筛选获得rhBMP-7成熟肽表达株,并进行了表达产物的活性测定。结果:表达产物存在于培养上清中,约占分泌蛋白总量的8%。经Western印迹分析可以检测到重组表达产物,ELISA检测其具有特异性结合活性。结论:构建了重组人骨形成蛋白-7成熟肽的基因工程菌并在甲醇酵母中实现了分泌表达,为进一步的活性及功能研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 人骨形成蛋白 成熟肽 巴斯德毕氏酵母 分泌表达 |
| 文章编号： | 1009-0002(2006)06-0862-03 |
| 收稿时间： | 04 19 2006 12:00AM |
| 修稿时间： | 2006年4月19日 |
Secreted Expression of Mature Peptide Gene of Human Bone Morphogenic Protein-7 in Pichia pastoris |
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| LIU Lei,WANG Hui,YAN Guang-tao,SHI Jing,BAO Shi-zhong,YIN Jun.Secreted Expression of Mature Peptide Gene of Human Bone Morphogenic Protein-7 in Pichia pastoris[J].Letters in Biotechnology,2006,17(6):862-864. |
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| Authors: | LIU Lei WANG Hui YAN Guang-tao SHI Jing BAO Shi-zhong YIN Jun |
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| Institution: | 1. Research Laboratory of Biochemistry, Basic Medical Institute, General Hospital of PLA, Beijing 100853; 2. State Key Laboratory of Pathogen and Biosecurity, Institute of Microbiology and Epidemiology, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100071; China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human bone morphogenic protein mature peptide Pichia pastoris secreted expression |
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