| 人可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ与IgG Fc融合蛋白在乳酸克鲁维酵母菌中的表达及产物分析 |
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| 引用本文： | 杨晓鹏,刘波,巩新,唱韶红,张义浜,吴军.人可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ与IgG Fc融合蛋白在乳酸克鲁维酵母菌中的表达及产物分析[J].生物技术通讯,2011,22(1):11-14. |
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| 作者姓名： | 杨晓鹏 刘波 巩新 唱韶红 张义浜 吴军 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划，国家自然科学基金，国家科技重大新药创制，国家科技支撑计划 |
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| 摘 要： | 目的:在乳酸克鲁维酵母中表达人可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ(sTNFRⅡ)与IgG Fc的融合蛋白。方法:首先获得sTNFRⅡ-IgGFc融合基因片段,然后构建至乳酸克鲁维酵母表达载体pKLAC1中,获得sTNFRⅡ-IgGFc的表达载体,并将其电转化乳酸克鲁维酵母(Δura3),通过ELISA方法筛选高表达sTNFRⅡ-IgGFc融合蛋白的重组乳酸克鲁维酵母菌株,采用还原和非还原SDS-PAGE分析融合蛋白是否形成二聚体结构,Western印迹验证sTNFRⅡ-IgGFc融合蛋白在乳酸克鲁维酵母(Δura3)中的表达。结果:构建了sTNFRⅡ-IgGFc表达载体pKLAC1-sTNFRⅡ-IgGFc,获得了表达sTNFRⅡ-IgGFc的乳酸克鲁维酵母菌株,SDS-PAGE和Western印迹表明该融合蛋白能自发形成类似于抗体的二聚体结构。结论:实现了sTNFRⅡ-IgGFc融合蛋白在乳酸克鲁维酵母(Δura3)中的表达。
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| 关 键 词： | 人可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ IgGFc 融合蛋白 乳酸克鲁维酵母 |
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