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| 抗HIV-1白喉免疫毒素的构建及原核表达 | |
| 引用本文： | 于芳,金宁一,李昌,刘玉生,佟敬山,金洪涛.抗HIV-1白喉免疫毒素的构建及原核表达[J].生物技术通讯,2007,18(5):753-755. |
| 作者姓名： | 于芳 金宁一 李昌 刘玉生 佟敬山 金洪涛 |
| 作者单位： | 1. 军事医学科学院,军事兽医研究所,吉林,长春,130062;长春理工大学,吉林,长春,130022 2. 军事医学科学院,军事兽医研究所,吉林,长春,130062 3. 军事医学科学院,军事兽医研究所,吉林,长春,130062;吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春,130062 |
| 摘 要： | 目的：构建重组DTA—hS120融合基因表达载体，并诱导其在大肠杆菌中表达。方法：通过PCR扩增，获得只含白喉毒素（DT）活性部位（DTA）的基因片段，将其克隆入原核表达载体pET-28a，转化大肠杆菌BL21（DE3），IPTG诱导表达，经SDS—PAGE和Western印迹分析鉴定。结果：酶切及DNA序列测定鉴定质粒构建正确；SDS—PAGE和Western印迹分析证实，可表达出相对分子质量为54000的融合蛋白，与DTA—hS-20融合蛋白的分子量一致；经凝胶成像分析，其表达量约占菌体总蛋白的23％，表达形式主要为包涵体。结论：构建了DTA—hS-20重组表达质粒，并获得了高效表达，为进一步研究抗HIV-1治疗药物奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 白喉毒素 基因克隆 免疫毒素 原核表达 |
| 文章编号： | 1009-0002（2007）05-0001-01 |
| 修稿时间： | 2007-01-30 |
Construction and Prokaryotic Expression of Anti-HIV-1 Diphtheria Toxin Immunotoxin |
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| Y Fang,JIN Ning-yi,LI Chang,LIU Yu-sheng,TONG Jing-shan,JIN Hong-tao.Construction and Prokaryotic Expression of Anti-HIV-1 Diphtheria Toxin Immunotoxin[J].Letters in Biotechnology,2007,18(5):753-755. | |
| Authors: | Y Fang JIN Ning-yi LI Chang LIU Yu-sheng TONG Jing-shan JIN Hong-tao |
| Institution: | 1. Institute of Military Veterinarian, Academy of Military Medical Sciences, Changchun 130062; 2. Changchun University of Science and Technology, Changchun 130022; 3. College of Animal Sciences and Veterinary Medicine, Jilin University, Changchun 130062; China |
| Abstract: | |
| Keywords: | diphtheria toxin gene cloning immunotoxin prokaryotic expression |
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