| 通过一种新方法使T7基因I置换araBAD基因簇 |
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| 引用本文： | 沈林,方宏清,戴红梅,李树龙,周长林,陈惠鹏.通过一种新方法使T7基因I置换araBAD基因簇[J].生物技术通讯,2009,20(5). |
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| 作者姓名： | 沈林 方宏清 戴红梅 李树龙 周长林 陈惠鹏 |
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| 作者单位： | 1. 中国药科大学生命科学与技术学院,江苏南京,210009
2. 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071 |
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| 摘 要： | 目的:用T7 RNA聚合酶基因T17基因I置换大肠杆菌基因组中的araBAD基因簇.方法:通过分析大肠杆菌基因组中araBAD基因序列,设计两侧同源臂,构建高拷贝数的打靶质粒,并且在这个质粒上的打靶片段两侧各加上一个归巢内切酶位点;将辅助质粒和打靶质粒同时转化到宿主体内,在L-阿拉伯糖的诱导下表达归巢内切酶和Red重组酶,实现体内重组,使T7基因I置换araBAD基因簇.结果:在4株不同的大肠杆菌中用T7基因I置换了araBAD基因簇.结论:成功地将T7基因,整合到araBAD基因位置,为构建Para-PT7表达系统奠定了基础.
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| 关 键 词： | 大肠杆菌 T7基因I araBAD基因簇 归巢内切酶 L-阿拉伯糖 |
Utilization of a New Method for Replacement of araBAD Genes by T7 Gene I |
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| SHEN Lin,FANG Hong-Qing,DAI Hong-Mei,LI Shu-Long,ZHOU Chang-Lin,CHEN Hui-Peng.Utilization of a New Method for Replacement of araBAD Genes by T7 Gene I[J].Letters in Biotechnology,2009,20(5). |
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| Authors: | SHEN Lin FANG Hong-Qing DAI Hong-Mei LI Shu-Long ZHOU Chang-Lin CHEN Hui-Peng |
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