| 靶向磷脂酰肌醇蛋白聚糖1的DNA适配体筛选 |
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| 引用本文： | 翟景勤,窦晓倩,王文宇,付洁,王宇光,宋海峰.靶向磷脂酰肌醇蛋白聚糖1的DNA适配体筛选[J].生物技术通讯,2018(1). |
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| 作者姓名： | 翟景勤 窦晓倩 王文宇 付洁 王宇光 宋海峰 |
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| 作者单位： | 安徽医科大学;军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所;军事科学院军事医学研究院生命组学医学研究所; |
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| 摘 要： | 目的:筛选获得特异性结合磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(GPC1)的单链DNA适配体。方法:合成全长81 nt,中间含39个随机序列的单链寡核苷酸(ss DNA)文库,运用指数富集配基系统进化(SELEX)技术筛选获得GPC1适配体;酶联免疫吸附分析法(ELISA)实验确定候选适配体与GPC1蛋白的亲和力,流式细胞术确定候选适配体与2种GPC1高表达细胞系(胰腺癌Panc-1细胞和工具细胞Luc-ZR-75-1~(GPC1))的结合特异性。结果:经过10轮SELEX筛选获得#9适配体,ELISA分析其亲和力为44±0.69 nmol/L,流式细胞术结果表明其与胰腺癌Panc-1细胞和Luc-ZR-75-1~(GPC1)细胞的阳性结合率分别为44.69%和51.44%。结论:筛选获得与GPC1蛋白有较高亲和力、与表达GPC1细胞系特异结合的ss DNA适配体。
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