| 无线粒体DNA的人肺腺癌A549细胞系的构建 |
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| 引用本文： | 李素芬,郝西琳,王唯斯,严长宝,赵妤,余敏,熊伟.无线粒体DNA的人肺腺癌A549细胞系的构建[J].生物技术通讯,2019(1):36-40,84. |
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| 作者姓名： | 李素芬 郝西琳 王唯斯 严长宝 赵妤 余敏 熊伟 |
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| 作者单位： | 大理大学基础医学院;大理白族自治州第一人民医院病理科;云南大学生命科学学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81560458;31601155;31760331);云南省教育厅科学研究基金(2016ZDX01;2016ZDX05);云南省中青年学术和技术带头人后备人才项目(2017HB077);大理大学大学生科研基金(KYSX2018032);大理大学第一批创新团队项目(ZKPY2019308) |
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| 摘 要： | 目的:建立无线粒体DNA(mtDNA)的人肺腺癌ρ~0A549细胞系。方法:在含50 ng/mL溴化乙锭(EB)、100μg/mL丙酮酸钠和50μg/mL尿嘧啶核苷的RPMI1640细胞培养基中传代培养A549细胞;用低剂量EB连续诱导培养35 d后,采用光镜观察、TaqMan探针法实时荧光定量PCR(qPCR)和Western印迹鉴定无mtDNA的ρ~0A549细胞系;采用MTT法测定ρ~0A549细胞增殖曲线。结果:倒置显微镜下野生型ρ^+A549细胞为多角形,ρ~0A549细胞形态呈拉长枝状;qPCR结果显示,低剂量EB诱导35 d的ρ~0A549细胞中无mtDNA的存在。Western印迹结果显示,ρ^+A549细胞中能表达核基因编码的线粒体蛋白SDHA和ATP5A,也能表达线粒体基因组编码的蛋白MT-COXI和MT-ATP6;ρ~0A549细胞中无MT-COXI和MT-ATP6蛋白表达,但核基因编码的SDHA和ATP5A蛋白能够正常表达。MTT结果显示,与ρ^+A549细胞相比,ρ~0A549细胞生长速度明显减慢,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:构建和鉴定了无mtDNA的人肺腺癌ρ~0A549细胞系,为后续探讨mtDNA缺失或突变与人肺腺癌发生之间的关系奠定了实验基础。
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| 关 键 词： | 线粒体DNA 缺失 肺腺癌 A549细胞系 |
Establishment of Mitochondrial DNA-Depleted Cell Line from Human Lung Adenocarcinoma A549 Cell |
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| LI Su-Fen,HAO Xi-Lin,WANG Wei-Si,YAN Chang-Bao,ZHAO Yu,YU Min,XIONG Wei.Establishment of Mitochondrial DNA-Depleted Cell Line from Human Lung Adenocarcinoma A549 Cell[J].Letters in Biotechnology,2019(1):36-40,84. |
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| Authors: | LI Su-Fen HAO Xi-Lin WANG Wei-Si YAN Chang-Bao ZHAO Yu YU Min XIONG Wei |
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| Institution: | (College of Basic Medical Sciences,Dali University,Dali 671000;Department of Pathology,First People's Hospital of Dali Prefecture,Dali 671000;College of Life Sciences,Yunnan University,Kunming 530061,China) |
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| Abstract: | LI Su-Fen;HAO Xi-Lin;WANG Wei-Si;YAN Chang-Bao;ZHAO Yu;YU Min;XIONG Wei(College of Basic Medical Sciences,Dali University,Dali 671000;Department of Pathology,First People's Hospital of Dali Prefecture,Dali 671000;College of Life Sciences,Yunnan University,Kunming 530061,China) |
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| Keywords: | mitochondrial DNA depletion lung adenocarcinoma A549 cell line |
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