| 人自身抗原SmB'的基因克隆和原核表达 |
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| 引用本文： | 杨湘越,兰小鹏,廖剑,钟智强,朱忠勇.人自身抗原SmB''''的基因克隆和原核表达[J].生物技术通讯,2006,17(5):707-709. |
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| 作者姓名： | 杨湘越 兰小鹏 廖剑 钟智强 朱忠勇 |
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| 作者单位： | 南京军区福州总医院,全军医学检验中心,福建,福州,350025 |
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| 基金项目： | 福建省青年人才科技创新基金项目(2002J060) |
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| 摘 要： | 目的:为建立新的自身抗体检测方法,自行克隆、表达和鉴定人自身抗原SmB'。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从白血病淋巴细胞HL-60细胞株中克隆人自身抗原SmB'全长基因;将PCR产物直接进行TA克隆、鉴定及测序,再定向克隆至pGEX-5T载体中,转入大肠杆菌BL-21;阳性克隆经鉴定后在IPTG诱导下表达,产物行SDS-PAGE和Western印迹。结果:PCR产物长约700bp,与预期的657bp接近,测序结果与GenBank核酸数据库报道完全一致。pGEX-5T-SmB'重组阳性克隆酶切鉴定正确,SDS-PAGE和Western印迹结果显示融合蛋白相对分子质量为51000,具有天然人自身抗原SmB'的免疫原性。结论:克隆表达了人自身抗原SmB',为建立相应的自身抗体检测方法奠定了基础。
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| 关 键 词： | 自身抗原 克隆 表达 融合基因 |
| 文章编号： | 1009-0002(2006)05-0707-03 |
| 收稿时间： | 01 9 2006 12:00AM |
| 修稿时间： | 2006年1月9日 |
Gene Cloning and Fusion Expression of Human Autoantigen SmB' in Escherichia coli |
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| YANG Xiang-yue,LAN Xiao-peng,LIAO Jian,ZHONG Zhi-qiang,ZHU Zhong-yong.Gene Cloning and Fusion Expression of Human Autoantigen SmB'''' in Escherichia coli[J].Letters in Biotechnology,2006,17(5):707-709. |
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| Authors: | YANG Xiang-yue LAN Xiao-peng LIAO Jian ZHONG Zhi-qiang ZHU Zhong-yong |
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| Institution: | PLA Medical Centre for Medical laboratory, Fuzhou General Hospital, Fuzhou 350025, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | autoantigens cloning expression gene fusion |
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