| 用改良的非同位素凝胶电泳迁移实验鉴定核酸适配体与靶蛋白的结合 |
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| 引用本文： | 葛兴枫,李慧,李少华,丁红梅,黄皑雪,白琛俊,刘雪梅,李洁,邵宁生.用改良的非同位素凝胶电泳迁移实验鉴定核酸适配体与靶蛋白的结合[J].生物技术通讯,2015(2):249-251. |
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| 作者姓名： | 葛兴枫 李慧 李少华 丁红梅 黄皑雪 白琛俊 刘雪梅 李洁 邵宁生 |
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| 作者单位： | 广西医科大学;军事医学科学院基础医学研究所 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(2012AA022501) |
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| 摘 要： | 目的:在核酸适配体与靶蛋白特异结合的凝胶电泳迁移实验(EMSA)测定方法中,探索使用非同位素标记取代同位素标记。方法:取一定量的生物素标记的核酸适配体与靶蛋白(或无关蛋白)于室温孵育,聚丙烯酰胺非变性凝胶电泳后将核酸适配体湿转至带正电荷的尼龙膜上,紫外交联,经蛋白酶K消化后,用化学发光法检测。结果:与未使用蛋白酶K消化组相比,经蛋白酶K消化后,可明显呈现核酸适配体与靶蛋白特异结合后产生的阻滞条带,其灵敏度不次于同位素标记的检测方法。结论:经蛋白酶K消化步骤优化的生物素标记的EMSA方法,可以替代放射性同位素标记的EMSA方法,用于核酸适配体与靶蛋白结合情况的鉴定。
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| 关 键 词： | 凝胶电泳迁移实验 适配体 凝胶电泳 非同位素标记 |
A Modified Non-Isotope EMSA Technique for Identification of Ap-tamer Binding to its Target Protein |
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| GE Xing-Feng;LI Hui;LI Shao-Hua;DING Hong-Mei;HUANG Ai-Xue;BAI Chen-Jun;LIU Xue-Mei;LI Jie;SHAO Ning-Sheng.A Modified Non-Isotope EMSA Technique for Identification of Ap-tamer Binding to its Target Protein[J].Letters in Biotechnology,2015(2):249-251. |
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| Authors: | GE Xing-Feng;LI Hui;LI Shao-Hua;DING Hong-Mei;HUANG Ai-Xue;BAI Chen-Jun;LIU Xue-Mei;LI Jie;SHAO Ning-Sheng |
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| Institution: | GE Xing-Feng;LI Hui;LI Shao-Hua;DING Hong-Mei;HUANG Ai-Xue;BAI Chen-Jun;LIU Xue-Mei;LI Jie;SHAO Ning-Sheng;Guangxi Medical University;Beijing Institue of Basic Medical Sciences; |
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