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质粒DNA抗原芯片检测抗双链DNA抗体的初步研究
引用本文:徐华,韩金祥,高雪芹,黄海燕,潘继红,王传玺.质粒DNA抗原芯片检测抗双链DNA抗体的初步研究[J].生物技术通讯,2006,17(6):895-897.
作者姓名:徐华  韩金祥  高雪芹  黄海燕  潘继红  王传玺
作者单位:山东省医药生物技术研究中心,卫生部生物技术药物重点实验室,山东省现代医用药物与技术重点实验室,山东,济南,250062
基金项目:山东省科技厅重点项目(003100104)
摘    要:目的:建立以质粒DNA作为抗原的检测血清中抗双链DNA(dsDNA)抗体的芯片方法,并与酶联免疫吸附实验比较,初步探讨用芯片法检测抗dsDNA抗体的临床价值。方法:将原核表达载体质粒pcDNAⅡ用质粒DNA快速抽提试剂盒提取纯化DNA后按1∶2稀释,用点样仪点在经3-氨丙基三乙氧基硅烷(APES)修饰的玻片上,温孵后用含有1%小牛血清白蛋白和2.5%蔗糖的PBST封闭,以Cy3标记的人IgG为二抗,建立检测dsDNA抗体的芯片方法,并与德国欧蒙公司生产的抗双链DNA检测ELISA试剂盒做比较,对包括58例系统性红斑狼疮(SLE)、25例干燥综合征(SS)、10例皮肌炎(DM)和7例类风湿关节炎(RA)在内的病人和60例健康人对照进行了抗dsDNA的对比检测。结果:对阳性标本的检测,与现用常规检测方法ELISA相比,芯片检测抗dsDNA的灵敏度为91.3%,特异度为90.7%,阳性预测值为89.3%,阴性预测值为92.5%;对健康对照的检测,2种方法均为阴性,符合率为100%。结论:与ELISA相比,用质粒DNA作为抗原建立的芯片方法的灵敏度和特异度较高,为今后建立同时检测多个自身抗体的芯片奠定了基础。

关 键 词:生物芯片  质粒DNA  抗双链DNA抗体
文章编号:1009-0002(2006)06-0895-03
收稿时间:01 23 2006 12:00AM
修稿时间:2006年1月23日

A Chip Technique for Detection of Anti-dsDNA by Using Plasmid DNA as Antigen
XU Hua,HAN Jin-xiang,GAO Xue-qin,HUANG Hai-yan,Pan Ji-hong,WANG Chuan-xi.A Chip Technique for Detection of Anti-dsDNA by Using Plasmid DNA as Antigen[J].Letters in Biotechnology,2006,17(6):895-897.
Authors:XU Hua  HAN Jin-xiang  GAO Xue-qin  HUANG Hai-yan  Pan Ji-hong  WANG Chuan-xi
Institution:Shandong Medicinal and Biotechnology Center, Key Laboratory for Biotech-Drugs Ministry of Health, Key Laboratory for Modern Medicine and Technology of Shandong Province, Jinan 250062, China
Abstract:
Keywords:biochip  plasmid DNA  anti-dsDNA antibody
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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