| 抗人血管内皮生长因子单链抗体基因的构建、表达及活性鉴定 |
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| 引用本文： | 杨西川,王大章,郑光勇,袁清安,俞炜源.抗人血管内皮生长因子单链抗体基因的构建、表达及活性鉴定[J].生物技术通讯,1998(4). |
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| 作者姓名： | 杨西川 王大章 郑光勇 袁清安 俞炜源 |
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| 作者单位： | 华西医科大学口腔医学院口腔颌面外科教研室，华西医科大学口腔医学院口腔颌面外科教研室，华西医科大学口腔医学院口腔颌面外科教研室，军事医学科学院生物工程研究所，军事医学科学院生物工程研究所 成都 610041，成都 610041，成都 610041，北京 100071，北京 100071 |
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| 摘 要： | 鼠单克隆抗体E11能与人血管内皮生长因子(VEGF)特异结合,已用于临床检测恶性肿瘤细胞VEGF的表达,并初步证明其体内抑瘤活性。为便于大规模生产,特进行基因工程改造,构建小分子的单链抗体(scFv)。首先通过逆转录及多聚酶链式反应(PCR),分离并克隆E11的可变区基因。经测序表明,E11轻链可变区(VL)基因全长333bp,编码111个氨基酸,归属小鼠轻链可变区基因第Ⅲ亚组。重链可变区VH基因全长369bp,编码123个氨基酸,归属小鼠重链可变区基因Ⅱ(A)亚组。然后用一编码亲水性多肽接头的DNA片断将E11单抗轻、重链可变区基因连接,构建表达质粒pET-15YV,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。表达产物(包含体)经变性及复性后,用免疫组化法检测该单链抗体结合抗原(颊癌)能力。对颊癌组织检测的结果表明,基因工程抗体scFv与亲代抗体一样,具有较高的组织特异性。本研究获得的抗人VEGF单链抗体具有潜在的临床价值,为肿瘤放射免疫显像及以血管为靶标的抗血管生成治疗奠定了基础。
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| 关 键 词： | VEGF 单链抗体 基因表达 |
Construction and expression of the variable gene encoding a single-chain antibody against human VEGF |
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| Yang Xichuan,Wang Dazhang,Zheng Guangyong.Construction and expression of the variable gene encoding a single-chain antibody against human VEGF[J].Letters in Biotechnology,1998(4). |
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| Authors: | Yang Xichuan Wang Dazhang Zheng Guangyong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | VEGF Single chain antibody (scFv) Expression |
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