| 带红色荧光蛋白靶向线粒体载体的构建与表达 |
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| 引用本文： | 郝好杰,凌贤龙,徐元基,杜芝燕,王妍,陈惠华,陆应麟.带红色荧光蛋白靶向线粒体载体的构建与表达[J].生物技术通讯,2005,16(4):371-373. |
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| 作者姓名： | 郝好杰 凌贤龙 徐元基 杜芝燕 王妍 陈惠华 陆应麟 |
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| 作者单位： | 1. 军事医学科学院基础医学研究所,北京,100850
2. 第三军医大学,附属新桥医院消化科,重庆,400038 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（30200141） |
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| 摘 要： | 选取由核表达的线粒体蛋白细胞色素C氧化亚单位Ⅷ（COX8）的前导序列为靶序列，从人胚胎肺成纤维细胞中扩增出COX8的前导序列，插入到pcDNA3．1／myc—HisA中，并将pDsRED1-n1中的红色荧光蛋白序列RFP克隆至COX8的下游，形成融合蛋白。在脂质体的介导下，将重组载体转染至肿瘤细胞中，在荧光显微镜下观察其在细胞内的表达及分布情况。构建的靶向线粒体的载体以及以红色荧光蛋白为报告基因的靶向线粒体的载体，经酶切、DNA序列测定，结果表明构建正确。将pcDNAmito—RFP转染到HeLa细胞的线粒体中，16h即可见散在荧光，72h达高峰，第10d开始减弱。以上结果表明成功构建了以红色荧光蛋白为报告基因的线粒体靶向的特异表达载体，在靶序列的引导下将红色荧光蛋白输入到线粒体中，为进一步对线粒体疾病的基因治疗研究提供了重要工具。
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| 关 键 词： | 线粒体 表达载体 靶向 红色荧光蛋白 |
| 文章编号： | 1009-0002(2005)04-0371-03 |
| 收稿时间： | 12 2 2004 12:00AM |
| 修稿时间： | 2004年12月2日 |
Construction and Expression of Mitochondrial Targeting Vector with Red Fluorescent Protein |
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| Hao HaoJie;Ling XianLong;Xu YuanJi;Du ZhiYan;Wang Yan;Chen HuiHua;Liu YingLin.Construction and Expression of Mitochondrial Targeting Vector with Red Fluorescent Protein[J].Letters in Biotechnology,2005,16(4):371-373. |
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| Authors: | Hao HaoJie;Ling XianLong;Xu YuanJi;Du ZhiYan;Wang Yan;Chen HuiHua;Liu YingLin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | mitochondrial expression vector target red fluorescent protein |
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