| 含人CCR5Delta32基因重组慢病毒的包装及滴度测定 |
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| 引用本文： | 安群星,穆士杰,张献清,陈蕤,夏爱军.含人CCR5Delta32基因重组慢病毒的包装及滴度测定[J].生物技术通讯,2007,18(6):891-893. |
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| 作者姓名： | 安群星 穆士杰 张献清 陈蕤 夏爱军 |
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| 作者单位： | 第四军医大学,西京医院输血科,陕西,西安,710032 |
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| 摘 要： | 目的：包装含人CCR5Delta32基因的重组慢病毒并测定其滴度，用于获得性免疫缺陷综合征（AIDS）的基因治疗研究。方法：从CCR5Deha32突变个体外周血单个核细胞（PBMC）中提取人基因组DNA，利用PCR技术扩增CCR5Deha32全长基因，经EcoRI单酶切后与pUCm—T载体连接，随后转化EcoliDH5ct，提取质粒进行酶切鉴定及DNA测序；将鉴定正确的CCR5Delta32基因亚克隆至慢病毒载体pLenti6／V5-D-TOPO并进行酶切鉴定及DNA序列分析；用pLP1、pLP2、pLP／VSVG及pLenti-CCR5Delta32等4种质粒共转染293T细胞，产生重组慢病毒并测定其滴度。结果：克隆出人CCR5Deha32基因，并构建了含该基因的重组慢病毒载体，经293T细胞包装后产生5×10^5TU／mL的重组慢病毒。结论：高滴度含人CCR5Deha32基因重组慢病毒的包装，为进一步的AIDS基因治疗研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | CCR5Delta32基因 慢病毒载体 包装 滴度测定 人免疫缺陷病毒 获得性免疫缺陷综合征 |
| 文章编号： | 1009-0002（2007）06-0891-03 |
| 修稿时间： | 2007-05-16 |
Package of the Recombinant Lentivirus Containing Human CCR5Delta32 Gene and Detection of its Titer |
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| AN Qun-xing,MU Shi-jie,ZHANG Xian-qing,CHEN Rui,XIA Ai-jun.Package of the Recombinant Lentivirus Containing Human CCR5Delta32 Gene and Detection of its Titer[J].Letters in Biotechnology,2007,18(6):891-893. |
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| Authors: | AN Qun-xing MU Shi-jie ZHANG Xian-qing CHEN Rui XIA Ai-jun |
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| Keywords: | CCR5Delta32 gene lentiviral vector package titer detection human immunodeficiency virus acquired immunodeficiency syndrome |
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