| 重组腺病毒介导人野生型P53和B7-1基因在喉癌细胞中的高效转移和高水平表达 |
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| 引用本文： | 邱兆华,王艳飞,潘鲁浙,劳妙芬,吴祖泽.重组腺病毒介导人野生型P53和B7-1基因在喉癌细胞中的高效转移和高水平表达[J].生物技术通讯,2002,13(1):6-10,17. |
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| 作者姓名： | 邱兆华 王艳飞 潘鲁浙 劳妙芬 吴祖泽 |
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| 作者单位： | 北京放射医学研究所,北京100850 |
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| 基金项目： | 美国百特医疗用品公司资助~~ |
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| 摘 要： | 为开展肿瘤的复合基因治疗，构建以串联方式携带人野生型p53和B7-1基因的重组腺病毒穿梭质粒pXC53/B7-1。将pXC53/B7-1与腺病毒包装质粒GT4050共转染293细胞，通过细胞内同源重组获得重组腺病毒Ad-p53/B7-1。在293细胞中扩增病毒，并通过氯化铯密度梯度超速离心纯化病毒，获得高滴度稿纯度的病毒，分别经免疫组织化学分析和流式细胞分析检测Ad-p53/B7-1介导的人野生型p53和B7-1基因在喉癌细胞ep-2中的表达。结果表明Ad-p53/B7-1能够有效地将其所携带的目的基因导入Hehp-2细胞并使其在细胞中高效表达。
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| 关 键 词： | 重组腺病毒 抑癌基因p53 免疫共刺激分子B7－1 复合基因治疗 喉癌细胞 基因转移 |
High-efficiency gene transfer and high-level co-expression of human wild p53 and B7-1 genes in laryngeal cancer cells via recombinant adenovirus |
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| Abstract.High-efficiency gene transfer and high-level co-expression of human wild p53 and B7-1 genes in laryngeal cancer cells via recombinant adenovirus[J].Letters in Biotechnology,2002,13(1):6-10,17. |
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| Authors: | Abstract |
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| Abstract: | In orderto developa combinedgenetherapyparadigmfor thetreatmentof cancer,a recombinantadenoviral shuttleplasmidpXC53/B7-1containinghumanwild-typep53and B7-1geneswas constructedby molecularcloning.RecombinantadenoviruseAd-p53/B7-1was constructedby homologousrecombinationof pXC53/B7-1and adenoviral packagingplasmidGT4050in293cells.Adenoviruseswithhightiterandpuritywereobtainedby amplifyingin293cellson a largescaleandultra-centrifugatinginCsClstepgradientsolutions.Theexpressionsof p53and B7-1genesinhuman laryngealepithelialcarcinomacellsHep-2weredeterminedrespectivelyby immunohistochemicalassayandflowcytometric analysis.The resultsshowedthathumanwild-typep53and B7-1genescouldbe efficientlyexpressedin Hep-2cells mediatedby Ad-p53/B7-1. |
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| Keywords: | adenovirus tumorsuppressorgene p53 costimulatoryfactorB7-1 combinationgenetherapy |
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