| HIV P66蛋白的表达、纯化及活性检测 |
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| 引用本文： | 马晶,郭秀婵,张晓光,张晓梅,曾毅.HIV P66蛋白的表达、纯化及活性检测[J].病毒学报,2006,22(5):364-368. |
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| 作者姓名： | 马晶 郭秀婵 张晓光 张晓梅 曾毅 |
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| 作者单位： | 中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,北京,100052 |
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| 基金项目： | 国家“973”计划（2005CB522903） |
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| 摘 要： | 此研究的目的是体外表达HIV-1逆转录酶P66亚单位蛋白,并得到纯度较高且具有活性的重组蛋白。首先通过PCR方法从含HIV-1 HXB2标准株全基因的质粒中扩增出全长p66基因,插入表达载体pTWIN1,构建pTWIN-p66质粒。再将该质粒转化到表达菌BL21,在IPTG诱导下表达P66蛋白。表达产物经几丁质柱一步纯化后得到P66蛋白纯品。纯化的P66蛋白分别催化B95-8细胞总RNA、RT试剂盒中对照RNA进行逆转录;同时以试剂盒中的M-MLV RT为对照进行相同的逆转录,PCR后电泳比较活性。结果显示我们构建的pTWIN-p66质粒在IPTG诱导下在原核细胞中P66亚单位蛋白表达量较高,经一步纯化后蛋白凝胶扫描纯度达88%,并具有较好的逆转录活性。与M-MLV RT体外活性比较,两者活性相当。该研究为进一步开发国产HIV确证诊断试剂及抗AIDS药物的研究打下了初步基础。
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| 关 键 词： | 慢病毒属 HIV-1 P66蛋白 原核表达 活性检测 |
| 文章编号： | 1000-8721（2006）05-0364-05 |
| 收稿时间： | 2006-03-03 |
| 修稿时间： | 2006-03-032006-07-05 |
Expression, Purification and Bioactivity Test of Human Immunodeficiency Virus P66 Protein |
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| MA Jing,GUO Xiu-chan,ZHANG Xiao-guang,ZHANG Xiao-mei,ZENG Yi.Expression, Purification and Bioactivity Test of Human Immunodeficiency Virus P66 Protein[J].Chinese Journal of Virology,2006,22(5):364-368. |
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| Authors: | MA Jing GUO Xiu-chan ZHANG Xiao-guang ZHANG Xiao-mei ZENG Yi |
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| Institution: | National Institute for Viral Disease Control and Prevention , China CDC , Beijing 100052, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Lentiviruss HIV-1 P66 protein prokaryotic expression bioactivity test |
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