| GeXP多重基因表达遗传分析系统在手足口病病原分型检测中的应用 |
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| 引用本文： | 胡秀梅,张勇,徐邦牢,杨梦,王淼,张晨,李瑾,白如银,周小棉,许文波,马学军.GeXP多重基因表达遗传分析系统在手足口病病原分型检测中的应用[J].病毒学报,2011,27(4):331-336. |
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| 作者姓名： | 胡秀梅 张勇 徐邦牢 杨梦 王淼 张晨 李瑾 白如银 周小棉 许文波 马学军 |
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| 作者单位： | 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点实验室,北京102206;广州医学院附属广州市第一人民医院检验科,广州510180;中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点实验室,北京,102206;广州医学院附属广州市第一人民医院检验科,广州,510180;暨南大学生殖免疫研究所,广州,510632 |
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| 基金项目： | 传染病防治重大专项(2009ZX10004-101,202,2008ZX10004-002,001,004) |
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| 摘 要： | 利用GeXP多重基因表达遗传分析系统,建立一种多重逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,同时检测引起手足口病的9种常见的人肠道病毒—人肠道病毒71型(HEV71)、柯萨奇病毒A组(CVA)16、4、5、9、10型和柯萨奇病毒B组(CVB)1、3、5型。优化多重反应体系中针对5’UTR区的肠道病毒通用引物和11对针对9种血清型人肠道病毒VP1区的特异性引物的浓度比例,分别以病毒细胞培养物和阳性粪便标本来验证多重反应体系的特异性,以TCID50定量的细胞培养物和克隆质粒体外转录的RNA梯度稀释液来检测多重检测体系的灵敏度。结果表明,优化后的多重检测体系,可扩增出人肠道病毒共有的保守片段的和型特异性片段,HEV71和CVA16细胞培养物的检测下限为100.5TCID50/μL,并可在103copies/μL水平同时、特异地检测出9种病毒RNA。该方法灵敏度高、特异性强,可快速对大量临床样本进行高通量检测,用于手足口病的分子流行病学调查。
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| 关 键 词： | GeXP系统 手足口病 多重RT-PCR |
Development of a GeXP based multiplex RT-PCR assay for simultaneous differentiation of nine human hand food mouth disease pathogens |
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| Hu Xiu-Mei,Zhang Yong,Xu Bang-Lao,Yang Meng-Jie,Wang Miao,Zhang Chen,Li Jin,Bai Ru-Yin,Zhou Xiao-Mian,Xu Wen-Bo,Ma Xue-Jun.Development of a GeXP based multiplex RT-PCR assay for simultaneous differentiation of nine human hand food mouth disease pathogens[J].Chinese Journal of Virology,2011,27(4):331-336. |
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| Authors: | Hu Xiu-Mei Zhang Yong Xu Bang-Lao Yang Meng-Jie Wang Miao Zhang Chen Li Jin Bai Ru-Yin Zhou Xiao-Mian Xu Wen-Bo Ma Xue-Jun |
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| Institution: | State Key Laboratory for Genetic Engineering and Molecular Virology, National Institute for Viral Disease Control and Prevention, Chinese Center for Disease Control and Prevention, Beijing 102206, China. |
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| Abstract: | |
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