我国HIV—1B‘／重组流行株Tat蛋白的表达、纯化及功能分析

根据全国HIV分子流行病学研究发现，B’和C亚型HIV－1在我国发生了重组，并以优势株形式在我国广泛流行。为了探讨这种HIV－1B’／C重组毒株tat基因的变异与其表型之间的关系。利用pET表达系统大肠杆菌中高效表达了三种不同基因变异类型的tat蛋白，重组蛋白占菌体总蛋白的26％，Western blot显示较好的反应原性，并通过金属鏊合层析纯化了目的蛋白。荧光素酶活性检测表明：体外表达的Tat蛋白具有明显的生物学活性，可以反式激活HIV LTR引导的报告基因的表达；三种Tat蛋白在激活活性上的差异与流行现场检测的病毒载量的高 存在明显的对应关系，说明tat基因的变异可以引起病毒生物学特性的改变，进而影响病毒的流行特征，此结果为进一步研究我国HIV重组毒株的基因变异特征及变异规律奠定了基础。