| 肠道病毒71型3D聚合酶转录激活域的界定 |
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| 引用本文： | 徐骁,姚云芳,李靖,柴克莉,乔文涛,谈娟.肠道病毒71型3D聚合酶转录激活域的界定[J].病毒学报,2016,32(5). |
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| 作者姓名： | 徐骁 姚云芳 李靖 柴克莉 乔文涛 谈娟 |
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| 作者单位： | 南开大学分子微生物与技术教育部重点实验室,南开大学生命科学学院,天津300071;南开大学分子微生物与技术教育部重点实验室,南开大学生命科学学院,天津300071;南开大学分子微生物与技术教育部重点实验室,南开大学生命科学学院,天津300071;南开大学分子微生物与技术教育部重点实验室,南开大学生命科学学院,天津300071;南开大学分子微生物与技术教育部重点实验室,南开大学生命科学学院,天津300071;南开大学分子微生物与技术教育部重点实验室,南开大学生命科学学院,天津300071 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划（973计划） |
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| 摘 要： | EV71是导致手足口病的主要病原体之一,其3D聚合酶作为依赖于RNA的RNA聚合酶,在病毒基因组转录及复制过程中发挥重要作用。当前,3D与宿主细胞的相互作用鲜有研究。酵母双杂交实验是研究蛋白质相互作用成熟有效的方法。本文将3D基因克隆至pGBKT7载体,构建了用于酵母双杂交实验的诱饵质粒,鉴定正确后转化酵母细胞AH109,依次检测了3D蛋白的表达、细胞毒性和自激活能力,结果表明3D基因可在AH109菌株中表达,对后者生长无显著影响,但融合蛋白具有自激活能力。进一步构建一系列含3D蛋白截短体的诱饵质粒,通过自激活实验界定了3D的最小转录激活域(1~94aa),为后续利用酵母双杂交技术研究与3D相互作用的细胞蛋白奠定了基础。
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| 关 键 词： | EV71 3D聚合酶 酵母双杂交 |
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