| 罗氏沼虾野田村病毒中国株RT-LAMP-LFD快速检测方法的研究 |
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| 引用本文： | 林锋,刘莉,郝贵杰,曹铮,盛鹏程,吴颖蕾,沈锦玉.罗氏沼虾野田村病毒中国株RT-LAMP-LFD快速检测方法的研究[J].病毒学报,2014,30(5). |
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| 作者姓名： | 林锋 刘莉 郝贵杰 曹铮 盛鹏程 吴颖蕾 沈锦玉 |
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| 作者单位： | 浙江省淡水水产研究所农业部淡水健康养殖重点实验室,湖州313001;浙江省淡水水产研究所农业部淡水健康养殖重点实验室,湖州313001;浙江省淡水水产研究所农业部淡水健康养殖重点实验室,湖州313001;浙江省淡水水产研究所农业部淡水健康养殖重点实验室,湖州313001;浙江省淡水水产研究所农业部淡水健康养殖重点实验室,湖州313001;浙江省淡水水产研究所农业部淡水健康养殖重点实验室,湖州313001;浙江省淡水水产研究所农业部淡水健康养殖重点实验室,湖州313001 |
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| 基金项目： | 农业部公益性行业专项(201103034);湖州市科技攻关项目(2012GN08);浙江省淡水养殖科技创新团队项目(2012R10026-11) |
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| 摘 要： | 罗氏沼虾白尾病(White tail disease,WTD)是流行于罗氏沼虾苗种阶段的重要疾病,该病病原被确定为罗氏沼虾野田村病毒(Macrobrachium rosenbergii Nodavirus,MrNV),为了建立罗氏沼虾野田村病毒中国分离株(MrNV-chin)的便捷、灵敏、特异的分子诊断方法,本研究根据罗氏沼虾野田村病毒RNA2基因保守序列的6个区域设计了4条特异性引物和1条检测探针,将环介导等温扩增技术与侧向流层析试纸(Lateral flow dipstick,LFD)相结合,建立了MrNV的RT-LAMP-LFD检测方法。结果表明,该方法的灵敏度是常规琼脂糖凝胶电泳的10倍;从核酸提取到检测结果判定仅需45min;反应特异性强,对其他虾类病毒WSSV、IHHNV、IMNV、TSV和YHV扩增结果均为阴性;操作简单,不需要复杂的仪器,在61℃水浴反应即可;利用LFD试纸显示结果,肉眼可直接观察判定。作为一种快速灵敏实用的分子诊断技术,该方法有利于罗氏沼虾白尾病的诊断与预防。
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| 关 键 词： | 罗氏沼虾野田村病毒 环介导等温扩增技术 侧向流层析试纸 |
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