棉铃虫核多角体病毒p10基因的序列及转录分析

为了利用棉铃虫核多角体病毒（HaSNPV）p10基因的启动子构建重组病毒杀虫剂及表达系统，应用末端测序法和引物步移法测定了p10基因的序列，并应用Northern杂交和引物延伸实验对该基因进行了深入的转录特性分析，HaSNPV p10基因被定位于基因组DNA的115.4kb-115.6kb处，转录方向与多角体基因相反，在其上下游分别发现了p26和p74基因。转录分析结果确定了p10基因是个极晚期基因，其转录从杆状病毒晚期转录保守序列GTAAG的第二个A开始，转录产物大小约为430nt。HaSNPV p10基因最早可检测到的转录是在病毒感染后的20h，随后其转录产物量迅速放大，到感染后72h达到非常高的水平。围康时相分析同时还检测到一个大小为1300nt的产物，推测该产物为p26和p10通读的转录产物。对HaSNPV P10蛋白序列的分析表明，该蛋白第6－44位及第51－65位氨基酸序列处含多个典型的卷曲螺旋七聚体重复结构，两片段间相隔6个氨基酸残基，在该蛋白序列的第20－34位与第51－65位存在L－X（2）－L－X（10）－L的亮氨酸重复。Helical net分析表明，HaSNPV P10的疏水氨式酸分布为两个集簇区，两者互为180度转角。