| 表达猪细小病毒VP2基因的重组伪狂犬病毒的构建及其生物学特征研究 |
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| 引用本文： | 吕建强,陈焕春,赵俊龙,方六荣,何启盖,熊符.表达猪细小病毒VP2基因的重组伪狂犬病毒的构建及其生物学特征研究[J].病毒学报,2004,20(2):133-137. |
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| 作者姓名： | 吕建强 陈焕春 赵俊龙 方六荣 何启盖 熊符 |
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| 作者单位： | 华中农业大学,农业部农业微生物重点实验室,武汉,430070;华中农业大学,农业部农业微生物重点实验室,武汉,430070;华中农业大学,农业部农业微生物重点实验室,武汉,430070;华中农业大学,农业部农业微生物重点实验室,武汉,430070;华中农业大学,农业部农业微生物重点实验室,武汉,430070;华中农业大学,农业部农业微生物重点实验室,武汉,430070 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 根据Bergeron等报道的猪细小病毒(PPV)基因组,设计一对包含VP2全基因的PCR引物,上下游均引入一个BamHI位点,扩增得到VP2基因后,将其插入到pUSK载体中,构建了转移载体pUSK-VP2.采用脂质体介导的转染方法,将伪狂犬病毒TK-/gG-/LacZ 株的基因组DNA与pUSK-VP2共转染PK-15细胞,待细胞病变后收集病毒液,在空斑纯化的同时,利用检测PPV VP2基因和LacZ基因的PCR方法筛选重组病毒TK-/gG-/VP 2株,Southern blotting、SDS-PAGE、Western blotting和电镜观察鉴定重组病毒,并在不同细胞上测定重组病毒的增殖滴度,接种小鼠进行安全性试验.结果发现,外源基因VP2已成功地插入到TK-/gG-/LacZ 亲本株的基因组中,并获得了表达.表达的VP2蛋白可以与猪细小病毒阳性血清反应,而且可以自行装配成病毒样颗粒.同时发现,VP2基因的插入不影响重组病毒的增殖特性,其毒力与亲本株相当.
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| 关 键 词： | 伪狂犬病毒 猪细小病毒 VP2基因 TK-/gG-/VP+2株 |
| 文章编号： | 1000-8721(2004)02-0133-05 |
The Development of Recombinant Pseudorabies Virus Expressing Porcine Parvovirus VP2 Gene and the Study on Its Biological Characters |
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| LV Jian-qiang,CHEN Huan-chun,ZHAO Jun-long,FANG Liu-rong,HE Qi-gai,XIONG Fuoratory of Ministry of Agriculture,Huazhong Agricultural University,Wuhan ,China.The Development of Recombinant Pseudorabies Virus Expressing Porcine Parvovirus VP2 Gene and the Study on Its Biological Characters[J].Chinese Journal of Virology,2004,20(2):133-137. |
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| Authors: | LV Jian-qiang CHEN Huan-chun ZHAO Jun-long FANG Liu-rong HE Qi-gai XIONG Fuoratory of Ministry of Agriculture Huazhong Agricultural University Wuhan China |
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| Institution: | LV Jian-qiang,CHEN Huan-chun,ZHAO Jun-long,FANG Liu-rong,HE Qi-gai,XIONG Fuoratory of Ministry of Agriculture,Huazhong Agricultural University,Wuhan 430070,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | pseudorabies virus porcine parvovirus VP_2 gene TK~ -/gG~ -/VP~ +_2 strain |
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