| 表达人冠状病毒NL63棘突蛋白不同片段的重组痘苗病毒的制备与表达分析 |
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| 引用本文： | 赵国霞,周为民,陆柔剑,王惠娟,赵敏,张庭瑛,邓瑶,高基民,谭文杰.表达人冠状病毒NL63棘突蛋白不同片段的重组痘苗病毒的制备与表达分析[J].病毒学报,2011,27(3):250-256. |
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| 作者姓名： | 赵国霞 周为民 陆柔剑 王惠娟 赵敏 张庭瑛 邓瑶 高基民 谭文杰 |
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| 作者单位： | 温州医学院医学病毒学研究所,温州,325000;中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程重点实验室,北京,102206;中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程重点实验室,北京,102206;温州医学院医学病毒学研究所,温州,325000 |
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| 基金项目： | 国家863课题(2007AA02Z463,2007AA02Z464); 传染病重大专项(2008zx10004-014); 中澳卫生合作项目(CAHHF)EID07 |
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| 摘 要： | HCoV-NL63是新近发现的人冠状病毒,对其外膜糖蛋白-棘突蛋白的表达及功能的研究仍有待深入。本研究利用天坛株痘苗病毒载体,克隆构建可表达HCoV-NL63棘突蛋白四个片段(N端棘突蛋白:S1;C端棘突蛋白:S2;受体结合区大片段:RL;受体结合区小片段:RS)的重组痘苗病毒(vJSC1175-S1;vJSC1175-S2;vJSC1175-RL;vJSC1175-RS),酶切测序证实表达载体构建正确,免疫荧光分析(IFA)各重组痘苗病毒中棘突蛋白不同片段的表达与定位,Western-Blot分析表明各种重组蛋白表达正确。分析结果显示:4种重组蛋白均能有效表达,S1、RL及RS蛋白的荧光主要分布在细胞膜上,而S2蛋白的荧光则主要分布于细胞浆,各个片段的分子量大小与文献报道相同,并可进行正确的翻译修饰(糖基化)。本研究首次采用痘苗病毒天坛株载体构建制备了表达HCoV-NL63棘突蛋白不同片段的重组痘苗病毒,为进一步分析人冠状病毒HCoV-NL63棘突蛋白的结构功能及探索其抗原性和免疫原性奠定了基础。
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| 关 键 词： | 人冠状病毒NL63 棘突蛋白 受体结合区 重组痘苗病毒 表达 |
Characterization and development of recombinant vaccinia viruses expressing different segments of spike protein derived from human coronavirus NL-63 |
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| Zhao Guo-Xia,Zhou Wei-Min,Lu Rou-Jian,Wang Hui-Juan,Zhao Min,Zhang Ting-Yin,Deng Yao,Gao Ji-Ming,Tan Wen-Jie.Characterization and development of recombinant vaccinia viruses expressing different segments of spike protein derived from human coronavirus NL-63[J].Chinese Journal of Virology,2011,27(3):250-256. |
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| Authors: | Zhao Guo-Xia Zhou Wei-Min Lu Rou-Jian Wang Hui-Juan Zhao Min Zhang Ting-Yin Deng Yao Gao Ji-Ming Tan Wen-Jie |
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| Institution: | ZHAO Guo-xia1,2,ZHOU Wei-min2,LU Rou-jian2,WANG Hui-juan2,ZHAO Min1,ZHANG Ting-yin1,DENG Yao2,GAO Ji-ming1,TAN Wen-jie1,2(1.Institute of Medical Virology,Wenzhu Medical College,Wenzhu 325000,China,2.National Institute for Viral Disease Control and Prevention,State Key Laboratory for Molecular Virology and Genetic Engineering,Chinese Center for Disease Control and Prevention,Beijing 102206,China) |
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| Abstract: | The spike(S) glycoprotein of HCoV-NL63 is a major target in the development of diagnostic assays and vaccines,but its antigenic and immunogenic properties remain unclear.Four fragments coding spike proteins(S1,S2,RL and RS) from HCoV-NL63 were amplified and cloned into the expression vector derived from vaccinia virus(Tiantan strain),and recombinant vaccinia viruses expressing four segments of spike proteins were generated(vJSC1175-S1;vJSC1175-S2;vJSC1175-RL;vJSC1175-RS),respectively.Their expression locati... |
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| Keywords: | human coronavirus NL63(HCoV-NL63) spike glycoprotein(S) receptor binding domain(RBD) recombinant vaccinia virus(rVV) expression |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 PubMed 等数据库收录！ |
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