| 三种丙型肝炎包膜感染性假病毒颗粒的制备及初步应用研究 |
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| 引用本文： | 张柯,谭文杰,邓瑶,李津,吴小兵,阮力.三种丙型肝炎包膜感染性假病毒颗粒的制备及初步应用研究[J].病毒学报,2008,24(4). |
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| 作者姓名： | 张柯 谭文杰 邓瑶 李津 吴小兵 阮力 |
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| 作者单位： | 1. 中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,北京,100052
2. 中国天坛生物制品总公司,北京,100024 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)，国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 本研究构建携带HCV代表株H77(1a)、中国HeBei株(1b)以及JFH-1株(2a)丙型肝炎病毒完整的E1-E2包膜糖蛋白基因的表达质粒,间接免疫荧光法及Western blot验证了其在细胞膜(293细胞)上的正确表达.三种包膜质粒分别与慢病毒包装质粒pHR'CMV△8.2及携带EGFP报告基因的自灭活(Self-Inactivating,SIN)转移质粒pCS-CG共转染293FT细胞,产生三种不同基因型的丙型肝炎包膜感染性假型(pseudotyped)病毒颗粒,免疫荧光与Western blot分析验证了E1/E2包膜糖蛋白在假病毒颗粒上的表达与掺人,利用p24 ELISA法及感染性实验对HCV假病毒进行滴定.从上清中获得的HCV假病毒可以在体外感染肝癌细胞系Huh7及Huh7-CD81(且后者上的感染效率约为前者上的2～3倍);利用针对HCV E2蛋白的具有广谱交叉中和活性的单克隆抗体AP33建立了基于上述假病毒颗粒的丙肝病毒体外中和抗体滴定方法,并应用于丙型肝炎患者体内的中和抗体水平的研究.本研究成功包装了包括中国流行株在内的3种不同基因型的HCV包膜感染性假病毒颗粒并建立了基于假病毒颗粒的HCV体外中和抗体检测方法,为研究HCV感染早期特性及特异抗病毒药物的体外筛选提供了有效模型,并可用于HCV感染者体内及HCV基因工程疫苗免疫后中和抗体水平的分析.
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| 关 键 词： | 丙型肝炎病毒 中和抗体 假病毒 |
Development of Infectious Pseudo-particle Harboring Three Subtypes Hepatitis C Virus Giycoproteins and Their Application in Neutralization Assays |
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| ZHANG Ke,TAN Wen-jie,DENG Yao,LI Jing,WU Xiao-bing,RUAN Li.Development of Infectious Pseudo-particle Harboring Three Subtypes Hepatitis C Virus Giycoproteins and Their Application in Neutralization Assays[J].Chinese Journal of Virology,2008,24(4). |
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| Authors: | ZHANG Ke TAN Wen-jie DENG Yao LI Jing WU Xiao-bing RUAN Li |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hepatitis C virus neutralizing antibody pseudotype particle |
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